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分析-Legion新蟲 (小有名氣)
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SYBR Green I 會與ExoIII 之間會相互影響嗎
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1.在緩沖液中加入SYBR Green I 可以檢測到較高的熒光強度（1379 au.）;當在緩沖液中加入ExoIII，水浴37℃后再加入SYBR Green I 十分鐘后檢測熒光強度時只有198.4.這可以說明ExoIII會和SYBR Green I反應嗎？ 2..我在加入Exo III 37攝氏度培育半個小時后 又將這個酶滅活了20min ，最后加入染料SG I，十分鐘后檢測熒光，熒光值還是很低，只有100多。應該怎么樣才可以降低Exo III對SYBR Green I 的影響呢？ |
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2樓2014-10-17 22:27:00
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我做的是讓SYBR Green I 嵌入G四聯(lián)體里面發(fā)光，實驗證明G四聯(lián)體越多，加入相同量的SYBR Green I 得到的熒光強度也是越大的。 另外，我做的另一個實驗：在形成G四聯(lián)體后（G四濃度不斷增加）加入相同量的Exo III 培育（目的是想證明Exo III不能水解G四聯(lián)體），再加入相同量的SYBR Green I 培育就不會有逐漸增強的熒光強度，實驗現(xiàn)象是在低濃度范圍熒光強度都很低（接近于水平線），在中間濃度時（5mM）熒光強度達到最高值，然后隨著G四濃度的增大，熒光強度是不斷降低的。 這個實驗我已經(jīng)重復了很多次，每次都是這種現(xiàn)象，這是什么原因呢，是因為Exo III可能已經(jīng)剪切了G四聯(lián)體嗎？ |
3樓2014-10-18 09:54:01
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