 |
 |
 |
 |
 |
 |
||
 |
 |
 |
 |
 |
| 2 | 1/1 | 返回列表 |
| 查看: 3543 | 回復(fù): 1 | ||
308350576新蟲(chóng) (初入文壇)
|
[求助]
關(guān)于6%的尿素聚丙烯酰胺變性凝膠來(lái)跑RNA的一些問(wèn)題
|
|
由于是第一次做這個(gè)，所以都是一大堆的問(wèn)題，希望大家多多發(fā)言，謝謝。 我要建RNA測(cè)序文庫(kù)，要篩選50-500bp大小的RNA，但是考慮到要固定RNA的二級(jí)結(jié)構(gòu)，所以，要用6%的尿素聚丙烯酰胺變性凝膠來(lái)跑，我用的marker是• Radiolabeled Decade and Century markers (Life Technologies)貨號(hào)：am7778，這個(gè)marker，loading buffer是marker中帶的，現(xiàn)在問(wèn)題如下： 1.這個(gè)凝膠的配方是什么，是我們平時(shí)的蛋白膠的配方嗎？就是水，30%丙烯酰胺，tris，sds，過(guò)硫酸銨，temed？是只有分離膠，沒(méi)有濃縮膠哈？ 2.電泳緩沖液的配方是什么，是我們平時(shí)跑蛋白的時(shí)候，用的tbe（tris，甘氨酸，edta）嗎？還是有什么新的配方。 3.試驗(yàn)中需要注意些什么？比如說(shuō)，電泳的時(shí)候，電泳buffer中需要加些什么東西嗎？比如甲酰胺或者尿素，還有聽(tīng)說(shuō)在上樣的時(shí)候要吹上樣孔？就是用電泳buffer反復(fù)清洗上樣孔嗎？ 4.試驗(yàn)中都要保證是RNase free環(huán)境嗎?怎么保證？ 5.染膠用eb就可以嘛？切膠再在外線(xiàn)切膠臺(tái)就ok？拍照的話(huà)，就是在紫外曝光儀中就可以嘛？ 6.上樣的時(shí)候loading buffer中還要加其他東西嗎？像甲酰胺或者尿素之類(lèi)的。 7.還有就是甲酰胺或者尿素這個(gè)東西在這個(gè)實(shí)驗(yàn)中要用到嘛？在哪一步用到？ 問(wèn)題就這么多？請(qǐng)大家踴躍發(fā)言，多謝多謝！ |
回復(fù)此樓» 猜你喜歡
蛋白質(zhì)檢測(cè)：精準(zhǔn)分析，解鎖生物分子的密碼
已經(jīng)有0人回復(fù)
-
不合理蛙科研實(shí)驗(yàn)之小鼠實(shí)驗(yàn)：嚴(yán)謹(jǐn)設(shè)計(jì)，解析生命機(jī)制的重要載體
已經(jīng)有0人回復(fù)
-
化學(xué)工程及工業(yè)化學(xué)論文潤(rùn)色/翻譯怎么收費(fèi)?
已經(jīng)有236人回復(fù)
-
不合理蛙科研實(shí)驗(yàn)之重金屬檢測(cè)：精準(zhǔn)篩查，守護(hù)健康與環(huán)境的防線(xiàn)
已經(jīng)有0人回復(fù)
-
不合理蛙科研實(shí)驗(yàn)之“蛙測(cè)重金屬我背鍋三千”
已經(jīng)有0人回復(fù)
-
不合理蛙科研實(shí)驗(yàn)之“鼠逃三次我發(fā)三篇SCI”
已經(jīng)有0人回復(fù)
-
納米粒度分析
已經(jīng)有3人回復(fù)
-
林科院林化所招收材料與化工專(zhuān)業(yè)碩士，坐標(biāo)南京
已經(jīng)有0人回復(fù)
-
留學(xué)--博士招生
已經(jīng)有15人回復(fù)
-
化學(xué)工程，本211，求調(diào)劑，ab區(qū)不限
已經(jīng)有4人回復(fù)
» 本主題相關(guān)價(jià)值貼推薦，對(duì)您同樣有幫助:
- 短RNA的變性聚丙烯酰胺電泳
已經(jīng)有7人回復(fù)
- 尿素膠跑DNA（PCR產(chǎn)物），變性不完全
已經(jīng)有12人回復(fù)
- SDS聚丙烯酰胺凝膠電泳成像結(jié)果的若干問(wèn)題
已經(jīng)有6人回復(fù)
- 蛋白非變性聚丙烯酰胺凝膠電泳沒(méi)有條帶
已經(jīng)有7人回復(fù)
- 同樣長(zhǎng)度的單鏈DNA與雙鏈DNA為什么跑聚丙烯酰胺變性膠，條帶會(huì)出現(xiàn)在不同的位置
已經(jīng)有15人回復(fù)
- 為什么我的DNA 非變性聚丙烯酰胺凝膠電泳 跑成這個(gè)鬼樣？
已經(jīng)有12人回復(fù)
- 【求助】蛋白質(zhì)非變性聚丙烯酰胺凝膠電泳
已經(jīng)有16人回復(fù)
- 請(qǐng)教為什么我的非變性聚丙烯酰胺凝膠電泳后條帶有些彌散！
已經(jīng)有9人回復(fù)
- DNA非變性聚丙烯酰胺凝膠電泳所用loading buffer
已經(jīng)有7人回復(fù)
- 變性聚丙烯酰胺凝膠電泳電壓方面的問(wèn)題
已經(jīng)有20人回復(fù)
- 非變性聚丙烯酰胺凝膠不聚合
已經(jīng)有7人回復(fù)
- 聚丙烯酰胺凝膠電泳問(wèn)題的討論
已經(jīng)有17人回復(fù)
- 6%變性聚丙烯酰胺凝膠總是凝的不好 求指點(diǎn) 急啊 謝謝了
已經(jīng)有43人回復(fù)
- 聚丙烯酰胺膠中尿素的作用是什么？
已經(jīng)有4人回復(fù)
- 非變性聚丙烯酰胺凝膠電泳，染色問(wèn)題
已經(jīng)有8人回復(fù)
- 變性聚丙烯酰胺凝膠電泳制板的問(wèn)題
已經(jīng)有24人回復(fù)
- 【求助】變性聚丙烯酰胺電泳的marker怎么處理
已經(jīng)有9人回復(fù)
- 【求助/交流】請(qǐng)教聚丙烯酰胺凝膠問(wèn)題
已經(jīng)有9人回復(fù)
- 【求助/交流】非變性聚丙烯酰胺電泳
已經(jīng)有13人回復(fù)
- 【求助/交流】有意思的rna非變性凝膠電泳-之真相大白
已經(jīng)有10人回復(fù)
zuohuaangel
銅蟲(chóng) (小有名氣)
- 應(yīng)助: 0 (幼兒園)
- 金幣: 376.8
- 散金: 10
- 紅花: 3
- 帖子: 150
- 在線(xiàn): 30小時(shí)
- 蟲(chóng)號(hào): 216865
- 注冊(cè): 2006-03-12
- 性別: MM
- 專(zhuān)業(yè): 藥物化學(xué)
2樓2015-08-07 14:31:57
相關(guān)版塊跳轉(zhuǎn)
我要訂閱樓主 308350576 的主題更新
| 2 | 1/1 | 返回列表 |
| 最具人氣熱帖推薦 [查看全部] | 作者 | 回/看 | 最后發(fā)表 | |
|---|---|---|---|---|
|
[考研] 295材料工程專(zhuān)碩求調(diào)劑 +5 | 1428151015 2026-03-27 | 5/250 |
|
|---|---|---|---|---|
|
[考研] 085602 307分 求調(diào)劑 +6 | 不知道叫什么！ 2026-03-26 | 6/300 |
|
|
|
[考研] 265求調(diào)劑11408 +3 | 劉小鹿lu 2026-03-27 | 3/150 |
|
|
|
[考研] 求調(diào)劑 +6 | 張zz111 2026-03-27 | 7/350 |
|
|
|
[考研] 0703化學(xué) +6 | 妮妮ninicgb 2026-03-27 | 6/300 |
|
|
|
[考研] 一志愿北京化工大學(xué) 070300 學(xué)碩 336分 求調(diào)劑 +9 | vv迷 2026-03-22 | 9/450 |
|
|
|
[考研] 308求調(diào)劑 +7 | 墨墨漠 2026-03-25 | 7/350 |
|
|
|
[考研]
 材料與化工考研調(diào)劑
+16
|
孅華 2026-03-22 | 16/800 |
|
|
|
[考研] 一志愿陜師大生物學(xué)071000，298分，求調(diào)劑 +5 | SYA！ 2026-03-23 | 5/250 |
|
|
|
[考研] 329求調(diào)劑 +5 | 1() 2026-03-22 | 5/250 |
|
|
|
[考研] 352求調(diào)劑 +4 | 大米飯！ 2026-03-22 | 4/200 |
|
|
|
[考研] 081700 調(diào)劑 267分 +11 | 迷人的哈哈 2026-03-23 | 11/550 |
|
|
|
[考研] 281求調(diào)劑 +6 | Koxui 2026-03-24 | 7/350 |
|
|
|
[考研] 一志愿河工大 081700 276求調(diào)劑 +4 | 地球繞著太陽(yáng)轉(zhuǎn) 2026-03-23 | 4/200 |
|
|
|
[考研] 材料與化工304求B區(qū)調(diào)劑 +3 | 邱gl 2026-03-25 | 3/150 |
|
|
|
[考研] 考研一志愿蘇州大學(xué)初始315（英一）求調(diào)劑 +3 | sbdksD 2026-03-24 | 4/200 |
|
|
|
[考研] 307求調(diào)劑 +3 | 余意卿 2026-03-21 | 6/300 |
|
|
|
[考研] 280分求調(diào)劑 一志愿085802 +4 | PUMPT 2026-03-22 | 7/350 |
|
|
|
[考研] 求調(diào)劑院校信息 +6 | CX 330 2026-03-21 | 6/300 |
|
|
|
[考研] 求調(diào)劑 +3 | .m.. 2026-03-21 | 4/200 |
|