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奇怪人生123銀蟲 (小有名氣)
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[求助]
構建絲狀真菌轉化子，產(chǎn)生一個沒有終止子的基因，請問它會如何轉錄和表達？求大神！ 已有1人參與
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我一直在做灰綠曲霉的相關研究，為了將我的目的蛋白與GFP融合表達，所以構建一個叫做pXL-zeo的質粒，通過單交換獲得轉化子，見我的附件圖。 最上方的是我構建的質粒，中間寫有“WT”的是野生株的基因組，最下方“NEW TYPE”指得到的轉化子的基因型。 對于轉化子的基因型，在前面的部位產(chǎn)生了一個有啟動子+目的基因完整ORF（但沒有終止子）的“基因”，緊跟其后的是構建質粒上的一部分序列，在后面的一坨就是抗性基因和我想要的表達盒。 那么問題來了！前方“啟動子+目的基因完整ORF”會如何轉錄及表達呢？希望各位大神能稍詳盡的分析，最好能有一些資料。 PS：我對目的基因和gfp做了Real-time PCR，得到目的基因veA表達量非常高，gfp表達量相對低，但是通過轉化子的表型分析，該轉化子更像是目的基因功能缺失的菌株。 單交換.png |
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2樓2014-10-25 10:53:23
奇怪人生123
銀蟲 (小有名氣)
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3樓2014-10-27 12:11:50
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