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supermary000金蟲(chóng) (小有名氣)
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[交流]
HPLC峰形問(wèn)題
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最近在檢測(cè)一個(gè)化合物的純度，含有兩個(gè)F,還有兩個(gè)C手性中心，以前沒(méi)有分離過(guò)類似的東西，用的安捷倫的苯基柱，流動(dòng)相A相是0.05%TFA水，B相是乙腈，梯度B相從50%升到90%，走出來(lái)峰形很難看，但在質(zhì)譜上看確實(shí)是一個(gè)化合物，不知道是不是手性的影響，還請(qǐng)大家多交流交流啊，感謝�。。。�！是不是必須要用手性柱才可以？？？ 捕獲.PNG |
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kf1009
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2樓2014-10-24 14:04:20
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3樓2014-10-25 06:41:49
mzhyan
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| 你用苯基柱，你的化合物是不是也含有苯基？含有2個(gè)F,你是想分離苯環(huán)上不同點(diǎn)位的取代異構(gòu)體？最好能把化合物結(jié)構(gòu)給出來(lái)。如果你的柱子沒(méi)問(wèn)題，你的化合物應(yīng)該有伯胺或叔胺基團(tuán)，才會(huì)在0.05%的TFA酸性流動(dòng)相中拖尾。要解決拖尾，1.換適合的柱子，選擇封尾較好的色譜柱，硅膠柱表面的硅羥基少了，拖尾自然就好了；2.流動(dòng)相中加離子對(duì)試劑，加磺酸類離子對(duì)試劑，流動(dòng)相pH值控制在2~3；3.調(diào)高流動(dòng)相pH值，最好比你分析的化合物pka值高1.0以上，但要注意你色譜柱的耐受性，你最好選用耐高pH值的色譜柱，4.如果你對(duì)峰型要求不是特別苛刻，流動(dòng)相用20mmol KH2PO4，用磷酸調(diào)pH2.5做緩沖液，也能減少你的拖尾。 |
7樓2014-10-27 14:41:44
huasangma
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supermary000
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