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1樓 2014-10-26 21:50:13

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cnzpli

金蟲(chóng) (正式寫(xiě)手)

應(yīng)助: 19 (小學(xué)生)
金幣: 964.9
散金: 1147
紅花: 4
帖子: 538
在線: 65.3小時(shí)
蟲(chóng)號(hào): 3416130
注冊(cè): 2014-09-14
性別: GG
專業(yè): 食品科學(xué)

樓主威武沒(méi)學(xué)過(guò)分子克隆都能做原核表達(dá)

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7樓2014-10-26 23:37:59

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普通回帖

Neo2000

木蟲(chóng) (著名寫(xiě)手)

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專業(yè): 生物物理、生物化學(xué)與分子

【答案】應(yīng)助回帖

★ ★
感謝參與，應(yīng)助指數(shù) +1
gyesang: 金幣+2, 鼓勵(lì)交流！ 2014-10-27 00:24:36

融合到GST上試試，也可以試試用Rosrtta菌株

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2樓2014-10-26 21:59:59

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legend811

禁蟲(chóng) (小有名氣)

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3樓2014-10-26 22:06:40

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enzyming

新蟲(chóng) (小有名氣)

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4樓2014-10-26 22:36:15

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Neo2000

木蟲(chóng) (著名寫(xiě)手)

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專業(yè): 生物物理、生物化學(xué)與分子

【答案】應(yīng)助回帖

★ ★ ★ ★ ★
legend811: 金幣+5, ★★★很有幫助 2014-10-27 02:49:04

引用回帖:

3樓: Originally posted by legend811 at 2014-10-26 22:06:40
我也在考慮更換菌株。如果更換載體的話，請(qǐng)問(wèn)是怎么操作的啊？將現(xiàn)有的載體質(zhì)粒，雙酶切后，膠回收獲得目的基因，然后將回收的目的DNA片段與另一新的空載體進(jìn)行雙酶切后連接，可行嗎？...

你只要閱讀框?qū)?zhǔn)了，沒(méi)問(wèn)題

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5樓2014-10-26 22:42:57

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legend811

禁蟲(chóng) (小有名氣)

本帖內(nèi)容被屏蔽

6樓2014-10-26 22:46:04

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legend811

禁蟲(chóng) (小有名氣)

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8樓2014-10-27 00:04:17

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帶走云彩

銀蟲(chóng) (小有名氣)

應(yīng)助: 4 (幼兒園)
金幣: 424.5
紅花: 2
帖子: 172
在線: 47.4小時(shí)
蟲(chóng)號(hào): 2399348
注冊(cè): 2013-03-31
性別: GG
專業(yè): 生物物理、生物化學(xué)與分子

引用回帖:

5樓: Originally posted by Neo2000 at 2014-10-26 22:42:57
你只要閱讀框?qū)?zhǔn)了，沒(méi)問(wèn)題
...

目的基因自己帶個(gè)起始密碼子不就行了？

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怎知一死生為虛誕？

9樓2014-10-28 07:45:08

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劉洪巖

銅蟲(chóng) (初入文壇)

應(yīng)助: 1 (幼兒園)
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【答案】應(yīng)助回帖

★ ★
感謝參與，應(yīng)助指數(shù) +1
legend811(西門(mén)吹雪170代發(fā)): 金幣+2, 鼓勵(lì)回帖交流 2014-10-29 08:52:34

如果你準(zhǔn)備換的載體，酶切位點(diǎn)和原來(lái)的一樣，就用原來(lái)的引物，用質(zhì)�；蛘呔曜鳛槟０�，進(jìn)行PCR，得到的產(chǎn)物再進(jìn)行酶切，連接，表達(dá)；如果你準(zhǔn)備換的載體，酶切位點(diǎn)和原來(lái)的不一樣，就重新設(shè)計(jì)引物，然后用質(zhì)�；蛘呔鳛槟０�，進(jìn)行PCR，得到的產(chǎn)物酶切，連接到新載體，然后表達(dá)。
做表達(dá)是很煩的事情，尤其是小肽。我原來(lái)也做過(guò)小肽，不一定是載體的問(wèn)題，也可能是菌株的問(wèn)題，其他的條件也是需要摸索優(yōu)化的。
希望樓主成功！

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過(guò)好每一天，走好每一步

10樓2014-10-28 08:51:32

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