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nickjackson鐵蟲 (初入文壇)
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[求助]
熒光定量PCR試驗中，自設探針和引物使得陰性對照跑出曲線，求分析原因？
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| 自己設計了一對引物，跑普通PCR鑒別抗原沒有問題，后來根據(jù)引物設計了探針，現(xiàn)在上熒光定量探針和引物同時加入做陰性對照都會跑出曲線，常理應該是靠近0基線的直線，調整了引物和探針的自身濃度，配比，均還是有曲線產(chǎn)生，通過軟件分析引物和探針也不發(fā)生聚合反應，求助有沒有其他原因導致此結果，現(xiàn)階段還在摸索引物和探針配比濃度。探針和引物配比做過1:1，1:2，1:4（20uL體系中），濃度也還在摸索。 |
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