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wucong5475新蟲 (初入文壇)
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怎么使用DNase 已有1人參與
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我的目的是除去蛋白質(zhì)樣品中的DNA成分,不知道怎么使用DNase,使用說明上寫的是怎樣提取RNA時去除DNA的方法,我試了,但我用紫外分光光度法測260nm的吸光值時,發(fā)現(xiàn)DNase使用前后沒有區(qū)別。是紫外分光光度法 有問題還是DNase的使用有問題?請指點(diǎn)。 DNase我是直接加入到蛋白樣液中,37度處理30分鐘甚至更久,然后加EDTA終止酶反應(yīng)。 加入10 μl 3 M醋酸鈉和250 μl冷乙醇,-80℃放置20 min。 5. 4℃,12,000 rpm離心10 min,棄上清。 6. 加入70%冷乙醇洗凈,4℃,12,000 rpm離心5 min,棄上清。 7. 沉淀干燥。 問題:1、是不是紫外分光光度法不能很好的檢測結(jié)果,DNA是否被消解的問題? 2、DNase的使用方法,是不是要在蛋白質(zhì)提取過程中加入才有效? |
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