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cuijing0529新蟲(chóng) (初入文壇)
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[求助]
關(guān)于DNA ladder檢測(cè)試劑盒 求助 已有1人參與
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| 我正在做水稻懸浮細(xì)胞細(xì)胞凋亡檢測(cè)，之前用手提總是提不出來(lái)，想買碧云天的dna ladder抽提試劑盒，但說(shuō)明書(shū)上寫的是做動(dòng)物細(xì)胞的，有沒(méi)有人用這個(gè)試劑盒提過(guò)植物細(xì)胞ladder？水稻的更好，效果怎么樣��？非常感謝��！ |
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cuijing0529
新蟲(chóng) (初入文壇)
- 應(yīng)助: 0 (幼兒園)
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- 在線: 21.1小時(shí)
- 蟲(chóng)號(hào): 1407343
- 注冊(cè): 2011-09-19
- 專業(yè): 蛋白質(zhì)組學(xué)
2樓2014-12-12 09:10:24
lanhongxia
鐵蟲(chóng) (初入文壇)
- 應(yīng)助: 3 (幼兒園)
- 金幣: 51.8
- 帖子: 16
- 在線: 10.8小時(shí)
- 蟲(chóng)號(hào): 1654669
- 注冊(cè): 2012-03-01
- 性別: MM
- 專業(yè): 細(xì)胞呼吸與代謝
【答案】應(yīng)助回帖
★ ★ ★
感謝參與，應(yīng)助指數(shù) +1
cuijing0529(西門吹雪170代發(fā)): 金幣+3, 鼓勵(lì)回帖交流 2014-12-12 20:22:51
感謝參與，應(yīng)助指數(shù) +1
cuijing0529(西門吹雪170代發(fā)): 金幣+3, 鼓勵(lì)回帖交流 2014-12-12 20:22:51
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碧云天的細(xì)胞凋亡-DNA ladder抽提試劑盒有兩款，有一個(gè)是寫的提取動(dòng)物細(xì)胞的，另一個(gè)是可以提取植物細(xì)胞的，這個(gè)是他的說(shuō)明書(shū) 使用說(shuō)明： 1.樣品收集 a)對(duì)于組織樣品： 切下組織，并剪切成小塊，置液氮中凍結(jié)，研碎或搗碎。或直接冰浴上勻漿。 b)對(duì)于貼壁細(xì)胞： 胰酶消化后，PBS或生理鹽水洗一次，1000-2000g離心1-2分鐘，棄上清，收集細(xì)胞。 c)對(duì)于懸浮細(xì)胞： 1000-2000g離心1-2分鐘，棄上清，收集細(xì)胞。 2.DNA ladder抽提 a)每1毫升樣品裂解液中加入5微升蛋白酶K，混勻。 b)對(duì)于上述收集好的樣品，每5毫克組織或者106個(gè)細(xì)胞中加入500微升添加了蛋白酶K的樣品裂解液， Vortex混勻，充分裂解組織或細(xì)胞。 c)50℃水浴消化過(guò)夜(通常12-20小時(shí)皆可)。 d)加入500微升Tris平衡苯酚。 e)Vortex劇烈混勻，使有機(jī)相和水相充分混合，以達(dá)到抽提效果。4℃，12,000g離心5分鐘。 f)緩慢吸出酚相及中間相(可以吸除少量靠近中間相的水相液體)，剩余的水相用等體積Tris平衡酚再抽提 一次(同步驟e)。 |
3樓2014-12-12 11:44:05
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