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cuijing0529新蟲 (初入文壇)
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[求助]
關(guān)于DNA ladder檢測試劑盒 求助 已有1人參與
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| 我正在做水稻懸浮細(xì)胞細(xì)胞凋亡檢測，之前用手提總是提不出來，想買碧云天的dna ladder抽提試劑盒，但說明書上寫的是做動物細(xì)胞的，有沒有人用這個試劑盒提過植物細(xì)胞ladder？水稻的更好，效果怎么樣啊？非常感謝��！ |
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cuijing0529
新蟲 (初入文壇)
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2樓2014-12-12 09:10:24
lanhongxia
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【答案】應(yīng)助回帖
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感謝參與，應(yīng)助指數(shù) +1
cuijing0529(西門吹雪170代發(fā)): 金幣+3, 鼓勵回帖交流 2014-12-12 20:22:51
感謝參與，應(yīng)助指數(shù) +1
cuijing0529(西門吹雪170代發(fā)): 金幣+3, 鼓勵回帖交流 2014-12-12 20:22:51
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碧云天的細(xì)胞凋亡-DNA ladder抽提試劑盒有兩款，有一個是寫的提取動物細(xì)胞的，另一個是可以提取植物細(xì)胞的，這個是他的說明書 使用說明： 1.樣品收集 a)對于組織樣品： 切下組織，并剪切成小塊，置液氮中凍結(jié)，研碎或搗碎�；蛑苯颖∩蟿驖{。 b)對于貼壁細(xì)胞： 胰酶消化后，PBS或生理鹽水洗一次，1000-2000g離心1-2分鐘，棄上清，收集細(xì)胞。 c)對于懸浮細(xì)胞： 1000-2000g離心1-2分鐘，棄上清，收集細(xì)胞。 2.DNA ladder抽提 a)每1毫升樣品裂解液中加入5微升蛋白酶K，混勻。 b)對于上述收集好的樣品，每5毫克組織或者106個細(xì)胞中加入500微升添加了蛋白酶K的樣品裂解液， Vortex混勻，充分裂解組織或細(xì)胞。 c)50℃水浴消化過夜(通常12-20小時皆可)。 d)加入500微升Tris平衡苯酚。 e)Vortex劇烈混勻，使有機相和水相充分混合，以達(dá)到抽提效果。4℃，12,000g離心5分鐘。 f)緩慢吸出酚相及中間相(可以吸除少量靠近中間相的水相液體)，剩余的水相用等體積Tris平衡酚再抽提 一次(同步驟e)。 |
3樓2014-12-12 11:44:05
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