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小木蟲論壇-學術(shù)科研互動平臺 » 化學化工區(qū) » 分析 » 化學分析 » 高效液相中加離子對的問題
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高效液相中加離子對的問題
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看到一個帖子說：用庚烷磺酸鈉甲醇混合液做流動相，進行方法開發(fā)，在使用6天后，發(fā)現(xiàn)這根柱子的柱效明顯降低，拖尾嚴重，出峰時間和以前明顯不同。用C18反相色譜柱做的 離子對的作用：使用液相色譜法分析電離能力比較強的樣品時，樣品在反相色譜柱上的保留時間很短或者根本不保留，這時要加入相應(yīng)的離子對試劑，將分析物上的離子進行結(jié)合，形成在柱子上有保留的分子。就像是一個物質(zhì)要穿色譜柱而過時，我們使用離子對試劑將它留住。 這些都是極性導致的，為什么我們不可以把反向色譜柱改為正相色譜柱呢？？這樣就可以避免使用對柱子損傷很大的離子對了 |
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小木蟲: 金幣+0.5, 給個紅包，謝謝回帖
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一、根據(jù)我的工作經(jīng)驗，有這幾種原因： 1. 因為C18是最常用的，凡是做分析的實驗室必備，但是正相柱就不是了，整個實驗室都是C18的情況很常見。 2. 有一種誤解：正相柱比反相的貴。其實不然。除了手性柱之外，常見的HILIC柱和反相柱價錢一般多。但是基于這種誤解不少人都根本不考慮正相。 3. 另一種誤解：除了反相就是正相。其實不然，正反只是相對而言，并無明顯的界限。雖然課本上有明確的定義但在實際操作中這個定義并沒有什么意義，一切還得以得到最佳色譜結(jié)果為原則。比如：amide柱，鍵合相是酰胺，常用來分離糖，假如我用40%的甲醇走等度，是固定相的極性大還是流動相的極性大？假如走梯度，從30%的甲醇走到70%的甲醇，固定相流動相誰的極性大呢？所以反相正相只有一點參考意義，無法明確區(qū)分。 二、為什么要用離子對試劑？ 影響色譜的兩個決定性因素：固定相和流動相。在沒有其他色譜柱的條件下，也就是無法改變固定相的前提下，只能改變流動相。讓反相色譜具備正相選擇性的辦法就是加離子對試劑。但是這種方法有很大的缺陷，那就是會損傷色譜柱，并且離子對試劑殘留在儀器中如果不完全清洗干凈還會影響其他實驗。 三、最好的辦法？ 換柱子。道理很簡單，用離子對試劑會損傷柱子，為什么不花錢買合適的色譜柱來避免使用離子對試劑呢？很可惜很多人想不明白這個道理。 |
9樓2014-12-15 14:50:21
lifucheng
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11樓2014-12-30 20:57:23
簡單回復
假大空3樓
2014-12-15 11:38
回復
呀呀好傻(金幣+1): 謝謝參與
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