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[求助]
PCR產(chǎn)物瓊脂糖凝膠電泳檢測(cè)，泳道很亮是什么原因？ 已有9人參與
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RT-PCR產(chǎn)物進(jìn)行瓊脂糖凝膠電泳檢測(cè)，泳道很亮，只有很淺的目的條帶，但marker跑得挺好的，是什么原因呢？ 麻煩見(jiàn)過(guò)這種現(xiàn)象的大神留下腳印，小女子不勝感激。 |
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【答案】應(yīng)助回帖
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感謝參與，應(yīng)助指數(shù) +1
myprayer: 金幣+1, 贈(zèng)人玫瑰手有余香，分子生物期待你更多精彩。 2014-12-18 22:39:47
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重新合成cDNA吧。 初步判斷可能是基因組污染了，因?yàn)閺狞c(diǎn)樣孔一直到目的條帶出現(xiàn)嚴(yán)重拖尾，表明各種大小的片段都有。 建議：1.重新用試劑盒提取RNA，再合成cDNA。2.如果不想提RNA，那么合成cDNA的時(shí)候，DNaseI處理的時(shí)間要加長(zhǎng)。3.合成cDNA的時(shí)候RNA多加一點(diǎn)。4.合成cDNA的時(shí)候42°C的時(shí)間如果1h不夠，可以延長(zhǎng)至1.5h或者2h。 |
20樓2014-12-17 23:57:19
4樓2014-12-16 08:38:16
2樓2014-12-15 22:40:27
jjf139
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3樓2014-12-16 07:39:31
5樓2014-12-16 08:39:50
z631535213
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6樓2014-12-16 08:51:41
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7樓2014-12-16 10:35:03
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8樓2014-12-16 10:42:32
searush
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9樓2014-12-16 13:05:05
10樓2014-12-16 14:33:26
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