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wangqing220新蟲(chóng) (初入文壇)
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陳述3種常見(jiàn)檢測(cè)細(xì)胞增殖的方法及其原理
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| 陳述3種常見(jiàn)檢測(cè)細(xì)胞增殖的方法及其原理 |
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方法：有絲分裂、無(wú)絲分裂、減數(shù)分裂 原理： 有絲分裂是真核生物進(jìn)行細(xì)胞分裂的主要方式。多細(xì)胞生物體以有絲分裂的方式增加體細(xì)胞的數(shù)量。體細(xì)胞進(jìn)行有絲分裂是有周期性的，也就是具有細(xì)胞周期。 細(xì)胞無(wú)絲分裂的過(guò)程比較簡(jiǎn)單，一般是細(xì)胞核先延長(zhǎng)，從核的中部向內(nèi)凹進(jìn)，縊裂成為兩個(gè)細(xì)胞核；接著，整個(gè)細(xì)胞從中部縊裂成兩部分，形成兩個(gè)子細(xì)胞。因?yàn)榉至堰^(guò)程中沒(méi)有出現(xiàn)紡錘絲和染色體，所以叫做無(wú)絲分裂。 減數(shù)分裂[1]是一種特殊方式有絲分裂，它與有性生殖細(xì)胞的形成有關(guān)。它是進(jìn)行有性生殖的生物，在原始的生殖細(xì)胞（如動(dòng)物的精原細(xì)胞或卵原細(xì)胞）發(fā)展為成熟的生殖細(xì)胞（精子或卵細(xì)胞）的過(guò)程中，要經(jīng)過(guò)減數(shù)分裂。在整個(gè)減數(shù)分裂過(guò)程中，染色體只復(fù)制一次，而細(xì)胞連續(xù)分裂兩次。減數(shù)分裂的結(jié)果是，新產(chǎn)生的生殖細(xì)胞中的染色體數(shù)目，比新原始的生殖細(xì)胞的減少一半。例如，人的精原細(xì)胞和卵原細(xì)胞中各有46條染色體，而經(jīng)過(guò)減數(shù)分裂形成的精子和卵細(xì)胞中，只含有23條染色體。 |
2樓2014-12-16 23:33:58
bbqlhb
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【答案】應(yīng)助回帖
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一、胸腺嘧啶核苷（3H-TdR）滲入法 胸腺嘧啶核苷（TdR）是DNA特有的堿基，也是DNA合成的必需物質(zhì)。用同位素3H標(biāo)記TdR即3H-TdR作為DNA合成的前體能摻入DAN合成代謝過(guò)程，通過(guò)測(cè)定細(xì)胞的放射性強(qiáng)度，可以反映細(xì)胞DAN的代謝及細(xì)胞增殖情況。但是具有放射性。 二、MTT檢測(cè)法 MTT檢測(cè)法主要反映細(xì)胞的能量代謝(energy metabolism)，是檢測(cè)細(xì)胞增殖活力的一種簡(jiǎn)便準(zhǔn)確的方法，其原理是在活細(xì)胞生長(zhǎng)和增殖過(guò)程中，線(xiàn)粒體內(nèi)的脫氫酶可將黃色的MTT分解成蘭紫色的甲（Formazan），生成的甲量的多少與細(xì)胞的數(shù)量和細(xì)胞的活力成正比 三、羥基熒光素二醋酸鹽琥珀酰亞胺脂（CFSE）檢測(cè)法 羥基熒光素二醋酸鹽琥珀酰亞胺脂（CFSE）是一種可穿透細(xì)胞膜的熒光染料，具有與細(xì)胞特異性結(jié)合的琥珀酰亞胺脂基團(tuán)和具有非酶促水解作用的羥基熒光素二醋酸鹽基團(tuán)，使C E成為一種良好的細(xì)胞標(biāo)記物。CFSE進(jìn)入細(xì)胞后可以不可逆地與細(xì)胞內(nèi)的氨基結(jié)合偶聯(lián)到細(xì)胞蛋白質(zhì)上。當(dāng)細(xì)胞分裂(cell pision)時(shí)，CFsE標(biāo)記熒光可平均分配至兩個(gè)子代細(xì)胞中，因此其熒光強(qiáng)度是親代細(xì)胞的一半。這樣，在一個(gè)增殖的細(xì)胞群中，各連續(xù)代細(xì)胞的熒光強(qiáng)度呈對(duì)遞減，利用流式細(xì)胞儀在488nm激發(fā)光和熒光檢測(cè)通道可對(duì)其進(jìn)行分析。 四、Brdu檢測(cè)法 Brdu中文全名5-溴脫氧尿嘧啶核苷，為胸腺嘧啶的衍生物，可代替胸腺嘧啶在DNA合成期（S期），活體注射或細(xì)胞培養(yǎng)加入，而后利用抗Brdu單克隆抗體，ICC染色，顯示增殖細(xì)胞。同時(shí)結(jié)合其它細(xì)胞標(biāo)記物，雙重染色，可判斷增殖細(xì)胞的種類(lèi)，增殖速度，對(duì)研究細(xì)胞動(dòng)力學(xué)有重要意義。 來(lái)源：http://www.bbioo.com/experiment/16-338903-1.html |
3樓2014-12-17 10:21:09
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