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wangqing220新蟲 (初入文壇)
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陳述3種常見檢測細胞增殖的方法及其原理
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| 陳述3種常見檢測細胞增殖的方法及其原理 |
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bbqlhb
木蟲 (小有名氣)
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【答案】應(yīng)助回帖
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一、胸腺嘧啶核苷（3H-TdR）滲入法 胸腺嘧啶核苷（TdR）是DNA特有的堿基，也是DNA合成的必需物質(zhì)。用同位素3H標(biāo)記TdR即3H-TdR作為DNA合成的前體能摻入DAN合成代謝過程，通過測定細胞的放射性強度，可以反映細胞DAN的代謝及細胞增殖情況。但是具有放射性。 二、MTT檢測法 MTT檢測法主要反映細胞的能量代謝(energy metabolism)，是檢測細胞增殖活力的一種簡便準(zhǔn)確的方法，其原理是在活細胞生長和增殖過程中，線粒體內(nèi)的脫氫酶可將黃色的MTT分解成蘭紫色的甲（Formazan），生成的甲量的多少與細胞的數(shù)量和細胞的活力成正比 三、羥基熒光素二醋酸鹽琥珀酰亞胺脂（CFSE）檢測法 羥基熒光素二醋酸鹽琥珀酰亞胺脂（CFSE）是一種可穿透細胞膜的熒光染料，具有與細胞特異性結(jié)合的琥珀酰亞胺脂基團和具有非酶促水解作用的羥基熒光素二醋酸鹽基團，使C E成為一種良好的細胞標(biāo)記物。CFSE進入細胞后可以不可逆地與細胞內(nèi)的氨基結(jié)合偶聯(lián)到細胞蛋白質(zhì)上。當(dāng)細胞分裂(cell pision)時，CFsE標(biāo)記熒光可平均分配至兩個子代細胞中，因此其熒光強度是親代細胞的一半。這樣，在一個增殖的細胞群中，各連續(xù)代細胞的熒光強度呈對遞減，利用流式細胞儀在488nm激發(fā)光和熒光檢測通道可對其進行分析。 四、Brdu檢測法 Brdu中文全名5-溴脫氧尿嘧啶核苷，為胸腺嘧啶的衍生物，可代替胸腺嘧啶在DNA合成期（S期），活體注射或細胞培養(yǎng)加入，而后利用抗Brdu單克隆抗體，ICC染色，顯示增殖細胞。同時結(jié)合其它細胞標(biāo)記物，雙重染色，可判斷增殖細胞的種類，增殖速度，對研究細胞動力學(xué)有重要意義。 來源：http://www.bbioo.com/experiment/16-338903-1.html |
3樓2014-12-17 10:21:09
想去的地方
新蟲 (小有名氣)
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- 專業(yè): 天然有機化學(xué)
【答案】應(yīng)助回帖
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方法：有絲分裂、無絲分裂、減數(shù)分裂 原理： 有絲分裂是真核生物進行細胞分裂的主要方式。多細胞生物體以有絲分裂的方式增加體細胞的數(shù)量。體細胞進行有絲分裂是有周期性的，也就是具有細胞周期。 細胞無絲分裂的過程比較簡單，一般是細胞核先延長，從核的中部向內(nèi)凹進，縊裂成為兩個細胞核；接著，整個細胞從中部縊裂成兩部分，形成兩個子細胞。因為分裂過程中沒有出現(xiàn)紡錘絲和染色體，所以叫做無絲分裂。 減數(shù)分裂[1]是一種特殊方式有絲分裂，它與有性生殖細胞的形成有關(guān)。它是進行有性生殖的生物，在原始的生殖細胞（如動物的精原細胞或卵原細胞）發(fā)展為成熟的生殖細胞（精子或卵細胞）的過程中，要經(jīng)過減數(shù)分裂。在整個減數(shù)分裂過程中，染色體只復(fù)制一次，而細胞連續(xù)分裂兩次。減數(shù)分裂的結(jié)果是，新產(chǎn)生的生殖細胞中的染色體數(shù)目，比新原始的生殖細胞的減少一半。例如，人的精原細胞和卵原細胞中各有46條染色體，而經(jīng)過減數(shù)分裂形成的精子和卵細胞中，只含有23條染色體。 |
2樓2014-12-16 23:33:58
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