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茜草科新蟲 (小有名氣)
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[求助]
同樣條件，壓力不一樣，出峰時(shí)間很大差別 已有3人參與
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我的流動(dòng)相是A：甲醇：水（1:1）+10mm乙酸銨和0.1%的甲酸 B：甲醇 前天做的時(shí)候不管是分離效果都達(dá)到了我的要求，可是同樣條件怎么都重復(fù)不出來了，欲哭無淚，大家?guī)蛶兔�，用到了緩沖鹽，感覺很不穩(wěn)定啊，平衡也是平衡了很久，兩個(gè)壓力都變了很多，但整體變化是差不多的，什么原因呢？ 謝謝�。。�！ |
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2014-12-19 10:32:45, 372.25 K
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2樓2014-12-19 14:32:01
呀呀好傻
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【答案】應(yīng)助回帖
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1.我做過就是發(fā)現(xiàn)保留時(shí)間很亂，發(fā)現(xiàn)都向前跑了，結(jié)果才發(fā)現(xiàn)是我的水相管道堵了，保留時(shí)間都往前移動(dòng) 2.還有一次就是壓力偏低，怎么做都上不去，我就做了一個(gè)流速試驗(yàn)，原來是流動(dòng)相從我洗泵的那個(gè)管道出滲出，導(dǎo)致流速?zèng)]有達(dá)到自己設(shè)置的1ml/min.前面是壓力偏低 3.壓力偏高的時(shí)候，我一般是把平時(shí)的水與甲醇梯度洗脫變成水與乙腈洗柱，乙腈就只有洗半個(gè)小時(shí)就可以把很多甲醇洗不下來的東西都洗出來 |
3樓2014-12-23 14:13:58
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5樓2014-12-24 09:03:00
cuiyebo
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【答案】應(yīng)助回帖
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你好，我剛看過你附的圖，應(yīng)該是梯度洗脫，跑出來的色譜圖；壓力明顯不一樣。我個(gè)人分析如下： 1.出現(xiàn)峰集中遷移，并且峰的相對位置不變；首先考慮的是流動(dòng)相中的有機(jī)相的比例變化（變化開始時(shí)間，變化速率，持續(xù)的時(shí)間）；其次是柱溫，（這個(gè)變化相對不是太大，您給的圖變化比較大，因此可以排除這個(gè)原因）；再次是送液問題，不知道你給的圖的先后順序，如果出現(xiàn)送液過程計(jì)量不準(zhǔn)或者是漏液，均會影響出峰的時(shí)間，這個(gè)可以重復(fù)進(jìn)樣，看看連續(xù)進(jìn)樣的重復(fù)性如何。 2.根據(jù)你給的圖，應(yīng)該是安捷倫的設(shè)備，原因可能是梯度后的平衡沒有平衡好，在泵位置有一個(gè)后運(yùn)行時(shí)間，填寫10分鐘-15分鐘，這個(gè)看看壓力變化就可以，我看你給的圖起點(diǎn)均一致，所以，有可能是平衡時(shí)間不夠；第二可能的原因，就是時(shí)間程序上有出題，時(shí)間程序表和泵初始比例是否一致，有機(jī)相變化的速率是不是有所變化，在高比例條件下，是否回歸初始比例等因素考慮。 以上僅是個(gè)人分析，僅供參考。不過您好想做的還是不表專業(yè)的，乍一看圖，俺還真沒看明白，哈哈哈，謝謝分享您工作的問題。 |
6樓2014-12-25 14:45:24
cuiyebo
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7樓2014-12-25 14:53:16
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