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茜草科新蟲 (小有名氣)
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[求助]
同樣條件,壓力不一樣,出峰時(shí)間很大差別 已有3人參與
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我的流動(dòng)相是A:甲醇:水(1:1)+10mm乙酸銨和0.1%的甲酸 B:甲醇 前天做的時(shí)候不管是分離效果都達(dá)到了我的要求,可是同樣條件怎么都重復(fù)不出來了,欲哭無淚,大家?guī)蛶兔,用到了緩沖鹽,感覺很不穩(wěn)定啊,平衡也是平衡了很久,兩個(gè)壓力都變了很多,但整體變化是差不多的,什么原因呢? 謝謝。。! |

金蟲 (職業(yè)作家)
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1.我做過就是發(fā)現(xiàn)保留時(shí)間很亂,發(fā)現(xiàn)都向前跑了,結(jié)果才發(fā)現(xiàn)是我的水相管道堵了,保留時(shí)間都往前移動(dòng) 2.還有一次就是壓力偏低,怎么做都上不去,我就做了一個(gè)流速試驗(yàn),原來是流動(dòng)相從我洗泵的那個(gè)管道出滲出,導(dǎo)致流速?zèng)]有達(dá)到自己設(shè)置的1ml/min.前面是壓力偏低 3.壓力偏高的時(shí)候,我一般是把平時(shí)的水與甲醇梯度洗脫變成水與乙腈洗柱,乙腈就只有洗半個(gè)小時(shí)就可以把很多甲醇洗不下來的東西都洗出來 |

金蟲 (職業(yè)作家)


金蟲 (小有名氣)
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你好,我剛看過你附的圖,應(yīng)該是梯度洗脫,跑出來的色譜圖;壓力明顯不一樣。我個(gè)人分析如下: 1.出現(xiàn)峰集中遷移,并且峰的相對(duì)位置不變;首先考慮的是流動(dòng)相中的有機(jī)相的比例變化(變化開始時(shí)間,變化速率,持續(xù)的時(shí)間);其次是柱溫,(這個(gè)變化相對(duì)不是太大,您給的圖變化比較大,因此可以排除這個(gè)原因);再次是送液?jiǎn)栴},不知道你給的圖的先后順序,如果出現(xiàn)送液過程計(jì)量不準(zhǔn)或者是漏液,均會(huì)影響出峰的時(shí)間,這個(gè)可以重復(fù)進(jìn)樣,看看連續(xù)進(jìn)樣的重復(fù)性如何。 2.根據(jù)你給的圖,應(yīng)該是安捷倫的設(shè)備,原因可能是梯度后的平衡沒有平衡好,在泵位置有一個(gè)后運(yùn)行時(shí)間,填寫10分鐘-15分鐘,這個(gè)看看壓力變化就可以,我看你給的圖起點(diǎn)均一致,所以,有可能是平衡時(shí)間不夠;第二可能的原因,就是時(shí)間程序上有出題,時(shí)間程序表和泵初始比例是否一致,有機(jī)相變化的速率是不是有所變化,在高比例條件下,是否回歸初始比例等因素考慮。 以上僅是個(gè)人分析,僅供參考。不過您好想做的還是不表專業(yè)的,乍一看圖,俺還真沒看明白,哈哈哈,謝謝分享您工作的問題。 |
金蟲 (小有名氣)
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