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呀咦呦新蟲(chóng) (初入文壇)
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[求助]
小鼠脾淋巴細(xì)胞分離 已有1人參與
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我在做小鼠實(shí)驗(yàn)，想分離脾臟淋巴細(xì)胞，現(xiàn)在提不出細(xì)胞啊，請(qǐng)各位大神指點(diǎn)一下，十分感謝。 具體實(shí)驗(yàn)操作如下：無(wú)菌剝離小鼠脾臟，置于5mL Hanks液中清洗一下，轉(zhuǎn)移至4 mL小鼠脾臟淋巴細(xì)胞分離液培養(yǎng)皿中，用兩個(gè)無(wú)菌載玻片的粗糙面對(duì)脾臟進(jìn)行研磨，5分鐘內(nèi)完成，用槍將細(xì)胞懸液緩慢沖幾次（勿劇烈），經(jīng)200目尼龍網(wǎng)過(guò)濾，放進(jìn)離心管內(nèi)，沿離心管壁小心加入1 mL RPMI-1640液，在2000 rpm離心15 min，用移液槍小心吸取兩層液面分界線下的細(xì)胞層即為淋巴細(xì)胞。 |
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