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[交流]
基因敲除、互補、功能研究等實驗怎么做？
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本人研究生，做黃單胞，在通過Tn5構建轉(zhuǎn)化子庫之后，通過致病力篩選、Tail-PCR獲得側翼序列、比對獲得全基因之后，將幾個可能與致病力相關的基因做了敲除，現(xiàn)在正在構建互補載體，已經(jīng)做了敲除轉(zhuǎn)化子的胞外酶活性測定、胞外多糖分泌測定、生長曲線、致病性測定等等，不過不知道將互補做完了之后還有什么可以做的。根據(jù)其他研究生、博士生等的畢業(yè)論文發(fā)現(xiàn)，基本也就是做這些：互補之后觀察致病力變化，然后討論可能性。 有些厲害的還做了蛋白，不過比較少，沒怎么看懂，實驗室做蛋白比較少。那我假如想繼續(xù)往下做，除了互補可以做哪些？而且老板經(jīng)常說做的太少，但是感覺分子實驗沒有太大的量，像現(xiàn)在構建載體，然后驗證，然后點擊互補，然后再驗證，然后做個Southern，感覺就差不多了。 看的文獻不夠廣，懂的也不多，請各位前輩大牛指教，交流下怎么這個實驗路線怎么設計，怎樣可以做好做深。  |
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