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如何確保DNA探針充分形成發(fā)夾結構 已有2人參與
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| 設計了發(fā)夾形DNA探針,由life technology合成,純度PAGE級,之前是按照100度變性10分鐘,然后置于室溫25度,復性30min以上。但后續(xù)應用效果不好。問題如下:1)如何表征發(fā)夾結構形成沒有?以及形成的比例?2)看到蟲友說確保緩慢降溫即可,那如何在PCR儀上實現緩慢降溫?3)也有的說緩慢降溫至退火溫度,那如何確定發(fā)夾探針的退火溫度?為什么雜交反應退火要求較Tm值低20-25度,而PCR反應要求退火溫度較Tm值低5度?亟待各位大俠回復,萬分感謝! |
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木蟲 (小有名氣)
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