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xinlvputao新蟲 (初入文壇)
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[交流]
如何確保DNA探針充分形成發(fā)夾結(jié)構(gòu) 已有2人參與
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| 設(shè)計(jì)了發(fā)夾形DNA探針，由life technology合成，純度PAGE級，之前是按照100度變性10分鐘，然后置于室溫25度，復(fù)性30min以上。但后續(xù)應(yīng)用效果不好。問題如下：1）如何表征發(fā)夾結(jié)構(gòu)形成沒有？以及形成的比例？2）看到蟲友說確保緩慢降溫即可，那如何在PCR儀上實(shí)現(xiàn)緩慢降溫？3）也有的說緩慢降溫至退火溫度，那如何確定發(fā)夾探針的退火溫度？為什么雜交反應(yīng)退火要求較Tm值低20-25度，而PCR反應(yīng)要求退火溫度較Tm值低5度？亟待各位大俠回復(fù)，萬分感謝！ |
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小木蟲: 金幣+0.5, 給個(gè)紅包，謝謝回帖
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2樓2015-12-09 22:10:34
xincer
木蟲 (小有名氣)
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- 專業(yè): 生化分析及生物傳感
3樓2015-12-14 17:31:04
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