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提取土壤總DNA跑膠沒(méi)條帶 求助 已有8人參與
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最近在提取土壤DNA，提取些出來(lái)的DNA直接跑水平膠有條帶，不過(guò)較暗 提取些出來(lái)的DNA經(jīng)過(guò)PCR后卻沒(méi)有條帶了，這是怎么回事，怎么改進(jìn)呢？求賜教。 [ 發(fā)自手機(jī)版 http://www.gaoyang168.com/3g ] |
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2樓2015-01-13 08:26:16
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西門(mén)吹雪170: 2015-01-13 22:26:56
西門(mén)吹雪170: 金幣+2, 鼓勵(lì)回帖交流 2015-01-13 22:27:37
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西門(mén)吹雪170: 金幣+2, 鼓勵(lì)回帖交流 2015-01-13 22:27:37
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您好啊，水平膠有條帶，但是暗，以為PCR之后能夠得到較多的量，但是PCR之后卻啥都沒(méi)有，所以問(wèn)題肯定出在你PCR的過(guò)程中啊。 PCR過(guò)程中出現(xiàn)問(wèn)題，得不到條帶，可以考慮一下幾個(gè)方面： ①引物設(shè)計(jì)是否合理 ②PCR時(shí)的反應(yīng)體系，尤其是酶，普通Taq酶有錯(cuò)配（但不至于一點(diǎn)也擴(kuò)不出來(lái)，可以換成熱啟動(dòng)Taq酶 熱啟動(dòng)Taq酶 ③ 擴(kuò)增前 模板是否已經(jīng)降解 |
4樓2015-01-13 09:42:48
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7樓2015-01-13 14:44:18
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