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supersky3195銀蟲 (小有名氣)
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[求助]
半定量一個(gè)組織PCR做不出來(lái)，求助 已有4人參與
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我是做3個(gè)組織的半定量，濃度開(kāi)始很高，在500ng左右，在500ng濃度時(shí)（是有些高），A和B組織的內(nèi)參和目的基因都能跑出來(lái)，C組織跑不出來(lái)，之后我就稀釋，并做了梯度，A和B 也都能跑出來(lái)，但是C卻跑不出來(lái)。我把初始濃度的模板跑了塊膠，都有亮帶，且C的最亮，將三個(gè)組織跑了內(nèi)參并且跑膠，也是能檢測(cè)出來(lái)，但為什么做半定量時(shí)C卻一直跑不出來(lái)。C組織我一共做了500ng,100ng,50ng,25ng的，都不理想，低濃度下只有零星的幾個(gè)能跑出來(lái)，但CT 較高，請(qǐng)問(wèn)各位高手大俠，小弟真是有些沒(méi)辦法了，是否需要將原模板用試劑盒純化下？ |
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3樓2015-01-15 10:23:01
cicelyzh
鐵桿木蟲 (職業(yè)作家)
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2樓2015-01-15 08:34:47
4樓2015-01-15 13:37:05
supersky3195
銀蟲 (小有名氣)
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5樓2015-01-15 19:33:01
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