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為啥跑sdspage,做蛋白樣品的時(shí)候,樣品有粘稠物?求高手指教 已有2人參與
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最近用BL21表達(dá)一個(gè)蛋白,本人一般取菌液1.5到2.5ml之間,加150到250的pbs和對(duì)應(yīng)的5×buffer,100度10min,12000轉(zhuǎn)10min,有沉淀,但吸取上清的時(shí)候總有一坨粘稠物,但是上清卻很清,根本看不到粘稠物。上樣之后也總感覺(jué)在孔里沉淀的很慢。以前做樣的時(shí)候不是這樣的,最近總是這樣。 還有我最近做的時(shí)候,剛開(kāi)始總是沒(méi)有沉淀,只有粘稠物,后來(lái)我發(fā)現(xiàn)降級(jí)loading buffer的濃度(我是把它當(dāng)成6×的來(lái)用),煮沸離心之后就有沉淀了,但是粘稠物還是在,就是我第一段描述的問(wèn)題了。 |


銀蟲(chóng) (正式寫手)
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