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[交流]
為啥跑sdspage，做蛋白樣品的時(shí)候，樣品有粘稠物？求高手指教 已有2人參與
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最近用BL21表達(dá)一個(gè)蛋白，本人一般取菌液1.5到2.5ml之間，加150到250的pbs和對(duì)應(yīng)的5×buffer，100度10min，12000轉(zhuǎn)10min，有沉淀，但吸取上清的時(shí)候總有一坨粘稠物，但是上清卻很清，根本看不到粘稠物。上樣之后也總感覺(jué)在孔里沉淀的很慢。以前做樣的時(shí)候不是這樣的，最近總是這樣。 還有我最近做的時(shí)候，剛開始總是沒(méi)有沉淀，只有粘稠物，后來(lái)我發(fā)現(xiàn)降級(jí)loading buffer的濃度（我是把它當(dāng)成6×的來(lái)用），煮沸離心之后就有沉淀了，但是粘稠物還是在，就是我第一段描述的問(wèn)題了。 |
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銀蟲 (正式寫手)
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3樓2015-01-17 18:53:41
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小木蟲: 金幣+0.5, 給個(gè)紅包，謝謝回帖
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4樓2015-01-18 09:33:08
5樓2015-01-18 12:11:44
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