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xiaomeng12銀蟲 (正式寫手)
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[求助]
微量紫外分光光度計(jì)
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| 前段日子實(shí)驗(yàn)室買了微量紫外分光光度計(jì)，發(fā)現(xiàn)比色皿模式與微量模式測出來的DNA濃度與OD值相差很大，請問是什么原因��？ |
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fuyuandj86
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kx444555: 金幣+2, 鼓勵(lì)交流 2015-01-22 16:44:36
kx444555: 金幣+2, 鼓勵(lì)交流 2015-01-22 16:44:36
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對(duì)于1 cm的光程，雙鏈DNA濃度=OD260*50 比色皿大多都是1cm光程，所以1.5對(duì)應(yīng)70ng/ul差不多 微量模式我只能假設(shè)你那個(gè)光程是0.5 cm所以算出來的濃度是300 至于兩個(gè)數(shù)字應(yīng)該相信哪一個(gè)，只憑這些信息也沒法判斷, 反正肯定有一個(gè)是錯(cuò)的沒跑了 常見的產(chǎn)生差異的可能原因： 1. 比色皿或者測量的容器本身有吸收，比如你用聚苯乙烯塑料做的比色皿或96孔板而不是石英的話，這些塑料就在OD260有吸收 2. 背景沒有做校正 3. 測量的值飽和了，不在線性區(qū)間內(nèi)，這個(gè)你就要自己翻一翻說明書或者做個(gè)標(biāo)準(zhǔn)曲線看一看 |
xiaomeng12
4樓2015-01-22 10:23:20
fuyuandj86
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5樓2015-01-22 22:23:46
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