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xiaomeng12銀蟲(chóng) (正式寫(xiě)手)
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[求助]
微量紫外分光光度計(jì)
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| 前段日子實(shí)驗(yàn)室買(mǎi)了微量紫外分光光度計(jì),發(fā)現(xiàn)比色皿模式與微量模式測(cè)出來(lái)的DNA濃度與OD值相差很大,請(qǐng)問(wèn)是什么原因。 |
銀蟲(chóng) (正式寫(xiě)手)
版主 (著名寫(xiě)手)
己所不欲,勿施于人

銀蟲(chóng) (正式寫(xiě)手)
版主 (著名寫(xiě)手)
己所不欲,勿施于人
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對(duì)于1 cm的光程,雙鏈DNA濃度=OD260*50 比色皿大多都是1cm光程,所以1.5對(duì)應(yīng)70ng/ul差不多 微量模式我只能假設(shè)你那個(gè)光程是0.5 cm所以算出來(lái)的濃度是300 至于兩個(gè)數(shù)字應(yīng)該相信哪一個(gè),只憑這些信息也沒(méi)法判斷, 反正肯定有一個(gè)是錯(cuò)的沒(méi)跑了 常見(jiàn)的產(chǎn)生差異的可能原因: 1. 比色皿或者測(cè)量的容器本身有吸收,比如你用聚苯乙烯塑料做的比色皿或96孔板而不是石英的話(huà),這些塑料就在OD260有吸收 2. 背景沒(méi)有做校正 3. 測(cè)量的值飽和了,不在線(xiàn)性區(qū)間內(nèi),這個(gè)你就要自己翻一翻說(shuō)明書(shū)或者做個(gè)標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)看一看 |

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