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綠筱一夏新蟲(chóng) (初入文壇)
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[求助]
5"race 技術(shù)識(shí)別轉(zhuǎn)錄起始位點(diǎn)的原理是什么？ 已有2人參與
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| 5‘race 為什么可以確定轉(zhuǎn)錄起始位點(diǎn)？ |
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紅衛(wèi)大兵
木蟲(chóng) (正式寫(xiě)手)
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2樓2015-01-20 08:39:06
【答案】應(yīng)助回帖
★
感謝參與，應(yīng)助指數(shù) +1
myprayer: 金幣+1, 贈(zèng)人玫瑰手有余香，分子生物期待你更多精彩。 2015-01-21 21:17:25
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| 為什么要做5'race呢，就是cDNA缺少5'信息，找不到合適的引物，所以拉不到全長(zhǎng)，5'race就是要在5‘端盡頭找一個(gè)引物，通過(guò)pcr就能知道全部序列信息了，這個(gè)引物怎么找呢，有很多方法，現(xiàn)在常用的就是在5’端（其實(shí)是cDNA 3'）加poly t，加完了以后用oligo A引物來(lái)拉出片段，因?yàn)閠是加在5'盡頭的，所以5'的序列信息都可以知道，起始知道的是cDNA3'的序列，如果反轉(zhuǎn)錄那一步跑到頭了，那cDNA3‘就可以反應(yīng)mRNA5'的信息，就是所謂的轉(zhuǎn)錄起始位點(diǎn)了，但反轉(zhuǎn)錄能不能跑到頭是個(gè)問(wèn)題，因此“5’race 技術(shù)識(shí)別轉(zhuǎn)錄起始位點(diǎn)”這句話(huà)是要打折扣的 |
3樓2015-01-20 10:30:31
綠筱一夏
新蟲(chóng) (初入文壇)
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4樓2015-01-20 12:43:49
5樓2015-01-20 15:40:42
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