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lxx707金蟲 (小有名氣)
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[求助]
求助:擴(kuò)線粒體基因組全序,中間有一段怎么都擴(kuò)不出來,不知道還能采取什么方法? 已有5人參與
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| 設(shè)計了不下20對引物了,有5對能擴(kuò)出2000左右的片段,但一般測序不出來。拿去克隆,再測序。再不同公司做了比較,有一段2000bp兩個公司做得一樣,但是NCBI BLAST無結(jié)果。其他三段比對不想似,NCBI上也比不出任何東西。萬能的親們,請多多指教,多給注意,實(shí)在是太感謝了! |
金蟲 (小有名氣)
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一般超過2000長度的,首選Phusion® High-Fidelity DNA Polymerase。 其擴(kuò)增效率高,錯誤率極低,或許能夠解決你的問題 關(guān)于測序,最好克隆到載體內(nèi)去測序,測序結(jié)果來說,2000bp都什么沒比對上很奇怪,你就是亂打的數(shù)據(jù)都能比對上好多,對于你的描述更多可能是克隆的片段出現(xiàn)問題,并不是你要的東西。 重新在進(jìn)行克隆測序,會有一些新的提示 |
金蟲 (小有名氣)

木蟲 (正式寫手)
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