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雪中花sml新蟲 (小有名氣)
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[求助]
PCR退火溫度設置 已有7人參與
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| 目前做PCR擴增，由于目的基因（1300bp）前面一段GC含量比較高的問題，設置的兩條引物，其中一條GC%為80%，Tm為77.7，另一條GC%為45%，Tm為54.3，以大家的經(jīng)驗覺得用這兩條引物擴增目的基因的退火溫度應該設置為多少呢 |
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2樓2015-02-05 19:27:37
781055707
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3樓2015-02-05 23:14:33
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雪中花sml(西門吹雪170代發(fā)): 金幣+1, 鼓勵回帖交流 2015-02-06 20:50:36
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| GC含量這么高，只從退火溫度上做改變的話，可能不一定好做，建議也是使用Hot start Taq酶擴增，配合專用的buffer，效果可能不錯，個人推薦 |
7樓2015-02-06 16:06:43
zshw_001
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8樓2015-02-06 16:31:11
9樓2015-02-06 18:12:40
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10樓2015-02-07 19:42:24
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