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[求助] 畢赤酵母發(fā)酵罐發(fā)酵問(wèn)題已有5人參與

大家好，我是一畢赤酵母發(fā)酵的新手，以前是做大腸桿菌的，工藝差不多穩(wěn)定了，現(xiàn)在公司發(fā)展了要用畢赤酵母發(fā)酵，以前沒(méi)整過(guò)，發(fā)了幾次，有點(diǎn)難度，下面是本人一次發(fā)酵的結(jié)果，請(qǐng)各位前輩幫忙解惑下啊

SDS-PAGE電泳圖請(qǐng)見(jiàn)附件

數(shù)字代表誘導(dǎo)時(shí)間，由于公司就我一個(gè)人弄發(fā)酵，所以晚上沒(méi)人看著，這個(gè)是個(gè)大問(wèn)題，但是最后一夜有點(diǎn)狀況，早上來(lái)的時(shí)候PH上升的較多，而我補(bǔ)加氨水的速率比前一夜要慢了，甲醇流加速率不變，但前一夜的PH正常穩(wěn)定啊，為什么最后一夜速率慢了PH反而還升高了？而且目的蛋白完全就沒(méi)了呢？

20150202 pPIC310-HuEGF SMD1163(發(fā)酵罐).jpg

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1樓 2015-02-10 14:09:08

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sjg_yuhuashi

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5樓: Originally posted by 青蛙良 at 2015-03-23 14:51:53
樓主你的問(wèn)題解決了嗎？我也遇到了相應(yīng)的問(wèn)題，不知道是否菌體老化降解造成的？

額，我想應(yīng)該主要是晚上沒(méi)人看管，PH值上升偏堿造成的，第二次發(fā)酵誘導(dǎo)了七十多個(gè)小時(shí)，PH值一直在6.5以下，沒(méi)有發(fā)生降解的情況

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7樓2015-03-30 15:44:54

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sjg_yuhuashi: 金幣+3, ★★★很有幫助 2015-03-30 15:47:32

溶氧有沒(méi)有啥異常變化？譬如也回升了，確定甲醇補(bǔ)料沒(méi)過(guò)量？

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2樓2015-03-02 16:22:05

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jesse860910

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你的DO怎么樣是不是也上升了？懷疑甲醇補(bǔ)的量不夠你沒(méi)有另外補(bǔ)過(guò)其他碳源吧

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3樓2015-03-04 09:22:04

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hunter1984

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zhang8826857: 金幣+1, 鼓勵(lì)應(yīng)助 2015-03-04 17:41:49
sjg_yuhuashi: 金幣+2, ★★★★★最佳答案 2015-03-30 15:52:29

肯定是甲醇補(bǔ)加不夠，引起pH值上升，你看看溶氧是不是也上升了，是的話基本可以斷定是營(yíng)養(yǎng)不夠

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4樓2015-03-04 15:09:50

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樓主你的問(wèn)題解決了嗎？我也遇到了相應(yīng)的問(wèn)題，不知道是否菌體老化降解造成的？

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5樓2015-03-23 14:51:53

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uranuser

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發(fā)酵到后期，菌體開(kāi)始衰老死亡了，一方面pH會(huì)上升，另一方面，菌體死亡破碎釋放出的蛋白酶會(huì)降解你的目的產(chǎn)物，所以你的目的產(chǎn)物會(huì)減少。至于你說(shuō)你補(bǔ)加氨水的速率比前一夜慢了，只能說(shuō)明還是不夠慢

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6樓2015-03-30 12:00:40

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2樓: Originally posted by 劉文瑤 at 2015-03-02 16:22:05
溶氧有沒(méi)有啥異常變化？譬如也回升了，確定甲醇補(bǔ)料沒(méi)過(guò)量？

恩，溶氧是上升了，但罐壓夜是上升的，所以就不好確定了，甲醇應(yīng)該是沒(méi)有過(guò)量的，我補(bǔ)加速率相比手冊(cè)和看過(guò)的文獻(xiàn)而言要慢不少

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8樓2015-03-30 15:47:09

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3樓: Originally posted by jesse860910 at 2015-03-04 09:22:04
你的DO怎么樣是不是也上升了？懷疑甲醇補(bǔ)的量不夠你沒(méi)有另外補(bǔ)過(guò)其他碳源吧

沒(méi)有其他碳源啊，ＤＯ就不好說(shuō)了，因?yàn)樵缟蟻?lái)的時(shí)候，罐壓也是增大了的，應(yīng)該是甲醇不夠吧，畢竟發(fā)酵罐條件有限，再加快補(bǔ)料速率，溶氧就跟不上了

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9樓2015-03-30 15:49:37

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4樓: Originally posted by hunter1984 at 2015-03-04 15:09:50
肯定是甲醇補(bǔ)加不夠，引起pH值上升，你看看溶氧是不是也上升了，是的話基本可以斷定是營(yíng)養(yǎng)不夠

額，溶氧真不好確定，因?yàn)橥砩蠜](méi)人看守，早上來(lái)的時(shí)候罐壓也是變大的，我猜估計(jì)也是碳源不夠了，因?yàn)槲业难a(bǔ)加速率相對(duì)手冊(cè)和別人的速率是慢了的，可是發(fā)酵罐條件有限，沒(méi)法再加快了

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10樓2015-03-30 15:51:57

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