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cs99900810銀蟲 (小有名氣)
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[求助]
求助！急包涵體純化！ 已有3人參與
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本人現(xiàn)在在做一個(gè)包涵體純化，NI柱純化，用尿素溶解蛋白，現(xiàn)在主要存在兩個(gè)問(wèn)題 1 目的蛋白與鎳柱結(jié)合效率不高 2純化后仍有雜帶 因?yàn)槭切率窒雴?wèn)問(wèn)大家是否有其他的方法能除去雜蛋白，能否用咪唑進(jìn)行純化，希望方法不要復(fù)雜，因?yàn)槲椰F(xiàn)在沒(méi)有分子篩純化的試劑與儀器，也沒(méi)有離子交換的有關(guān)東西 我不希望是復(fù)制粘貼的東西，如果真的能幫到我 我會(huì)追加金幣。另外我手上只有3kD的超濾管 圖片最后一個(gè)泳道是我的純化后蛋白，最上面的條帶為我的目的蛋白，約45KD左右  |
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【答案】應(yīng)助回帖
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cs99900810(西門吹雪170代發(fā)): 金幣+2, 鼓勵(lì)回帖交流 2015-03-10 22:36:57
cs99900810: 金幣+2 2015-03-11 08:51:46
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cs99900810: 金幣+2 2015-03-11 08:51:46
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1. 掛不上柱就延長(zhǎng)一下掛柱時(shí)間。 2. 這張圖上哪個(gè)是你的目的蛋白條帶啊？是不是最后一張圖的第二條？好歹P個(gè)箭頭啊。。。你這個(gè)蛋白應(yīng)該是降解的問(wèn)題，試試把His放到C端試試。 3. 純化包涵體時(shí)，用不同濃度的尿素洗一下。 |
2樓2015-03-10 17:39:08
cs99900810
銀蟲 (小有名氣)
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3樓2015-03-10 17:44:41
4樓2015-03-10 17:49:34
cs99900810
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5樓2015-03-10 17:58:35
liuderong
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6樓2015-03-11 22:49:16
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7樓2015-03-12 08:42:42
lxgnh166
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8樓2015-03-12 09:11:29
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9樓2015-03-12 09:47:31
mataomatao
禁蟲 (正式寫手)
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10樓2015-03-12 10:57:30
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