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是水貨木蟲 (著名寫手)
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[求助]
做電鏡的方法 已有4人參與
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求助:我是做蛋白凝膠的,以前做電鏡都是凍干后直接去測(cè)量,現(xiàn)在有文獻(xiàn)報(bào)道說做成膠體后,溶于2.5%戊二醛(pBS PH7.2)中1h。然后自來水沖洗,在采用50%,70%,80%,90%,100%的乙醇中,然后制成干樣。 那么我有以下問題想咨詢: 一、我做的是明膠,凝膠性較強(qiáng),應(yīng)當(dāng)凝膠成什么狀態(tài)為好?譬如濃度是6.67%,那么凝膠多久后合適?因?yàn)槟z時(shí)間過長(zhǎng)會(huì)導(dǎo)致測(cè)不出效果。 二、用不同梯度的無水乙醇洗脫,每個(gè)梯度需要的時(shí)間是多久? 三、洗脫后有的還沒有完全干,有文獻(xiàn)報(bào)道說是液氮或者干冰下弄干。實(shí)驗(yàn)室沒有這個(gè)怎么辦? 四、如果用冷凍干燥機(jī)抽真空干燥,樣品中含有少量的戊二醛和乙醇,會(huì)發(fā)生危險(xiǎn)嗎? 曾經(jīng)發(fā)過e-mail問過這個(gè)領(lǐng)域的大牛,卻沒得到任何回復(fù)。希望大家給予指點(diǎn)。 |

新蟲 (小有名氣)

版主 (知名作家)
日光之下,并無新事

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