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是水貨木蟲 (著名寫手)
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[求助]
做電鏡的方法 已有4人參與
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求助：我是做蛋白凝膠的，以前做電鏡都是凍干后直接去測(cè)量，現(xiàn)在有文獻(xiàn)報(bào)道說(shuō)做成膠體后，溶于2.5%戊二醛（pBS PH7.2)中1h。然后自來(lái)水沖洗，在采用50%,70%,80%,90%,100%的乙醇中，然后制成干樣。 那么我有以下問(wèn)題想咨詢： 一、我做的是明膠，凝膠性較強(qiáng)，應(yīng)當(dāng)凝膠成什么狀態(tài)為好？譬如濃度是6.67%，那么凝膠多久后合適？因?yàn)槟z時(shí)間過(guò)長(zhǎng)會(huì)導(dǎo)致測(cè)不出效果。 二、用不同梯度的無(wú)水乙醇洗脫，每個(gè)梯度需要的時(shí)間是多久？ 三、洗脫后有的還沒(méi)有完全干，有文獻(xiàn)報(bào)道說(shuō)是液氮或者干冰下弄干。實(shí)驗(yàn)室沒(méi)有這個(gè)怎么辦？ 四、如果用冷凍干燥機(jī)抽真空干燥，樣品中含有少量的戊二醛和乙醇，會(huì)發(fā)生危險(xiǎn)嗎？ 曾經(jīng)發(fā)過(guò)e-mail問(wèn)過(guò)這個(gè)領(lǐng)域的大牛，卻沒(méi)得到任何回復(fù)。希望大家給予指點(diǎn)。 |
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sytucom
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3樓2015-04-26 23:56:12
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5樓2015-04-27 22:20:03
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