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關(guān)于精密度、回收率的問(wèn)題，求大神幫幫我 已有1人參與
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大家好，我是大四本科生，馬上要畢業(yè)了，最近畢業(yè)論文中有許多問(wèn)題搞不清楚，特來(lái)此求助。情況是這樣的：我的畢業(yè)設(shè)計(jì)是測(cè)定維生素C的兩種方法的比較，用的是2,4-二硝基苯肼法和紫外分光光度法這兩種方法�，F(xiàn)在在寫(xiě)論文中，出現(xiàn)一些問(wèn)題使我感到費(fèi)解，還望大神相助。 1.在比較兩種方法的精密度時(shí)，我本來(lái)寫(xiě)的是樣品平行測(cè)定5次吸光度，計(jì)算RSD，可是我發(fā)現(xiàn)許多文獻(xiàn)中，是用標(biāo)準(zhǔn)樣品的測(cè)定值計(jì)算RSD的，和回收率寫(xiě)在了一張表上，我也在網(wǎng)上看到許多有關(guān)這個(gè)問(wèn)題的回復(fù)，可是說(shuō)法都不一致，有人說(shuō)用標(biāo)準(zhǔn)樣品衡量的是儀器的精密度，樣品是方法的精密度（樣品可以考察對(duì)系統(tǒng)的影響），這個(gè)合適么，我想知道到底哪種是衡量精密度最原始的方法呢？ 2.在比較兩種方法的回收率時(shí)，也遇到了類(lèi)似的問(wèn)題，當(dāng)時(shí)我們做的時(shí)候是稱(chēng)了兩份樣品，一份加一定量的標(biāo)準(zhǔn)樣品，同時(shí)進(jìn)行實(shí)驗(yàn)，最后計(jì)算回收率，可是老師說(shuō)一般回收率用標(biāo)準(zhǔn)樣品，讓我改為用標(biāo)準(zhǔn)樣品，并且兩種方法的標(biāo)樣濃度要配制成一樣（因?yàn)?,4-二硝基苯肼法的線性范圍是1～12μg/mL，紫外分光光度法是1～10μg/mL，所以取個(gè)一樣的值），再根據(jù)濃度推出應(yīng)該稱(chēng)標(biāo)樣多少克，我取的是6μg/mL，可我按方法步驟推出多少標(biāo)樣克數(shù)后計(jì)算回收率不合適，想問(wèn)下大家這個(gè)怎么算標(biāo)樣的克數(shù)呀（我把步驟寫(xiě)在下面了）？還有我上面說(shuō)的這兩種衡量回收率的哪種更合適？ 2,4-二硝基苯肼法：稱(chēng)1-4 g干樣(含 1-2 mg抗壞血酸)放入乳缽內(nèi)，加入10g/L草酸溶液溶液磨成勻漿，定容于100 mL容量瓶中。取25 mL上述濾液，加入2 g活性炭，振搖1 min，過(guò)濾，棄去最初數(shù)毫升濾液。取10 mL的濾液，加入20 g/L10mL硫脲溶液，混勻。于三個(gè)試管中各加入4mL經(jīng)氧化的試樣稀釋液。一個(gè)試管作為空白，在其余試管中加入 1.0 mL 20 g/L 2,4-二硝基苯肼溶液，將所有試管放入37±0.5℃水浴鍋中，保溫 3 h。3 h后取出，除空白管外，將所有試管放入冰水中。空白管取出后使其冷到室溫，然后加入1.0 mL 20 g/L 2,4-二硝基苯肼溶液，在室溫中放置10~15 min 后放入冰水內(nèi)。其余步驟同樣品。當(dāng)試管放入冰水后，向每一試管中加入5 mL85 %硫酸，滴加時(shí)間至少需要 1 min，需邊加邊搖動(dòng)試管。將試管自冰水中取出，在室溫放置 30 min 后比色。用1cm比色杯，以空白液調(diào)零點(diǎn)，于500nm波長(zhǎng)測(cè)吸光值。 紫外法：稱(chēng)取5.00g樣品于研缽中，加入1%鹽酸2-5 mL，勻漿，轉(zhuǎn)移并定容到25 mL容量瓶中。取0.2 mL提取液，放入盛有0.4 mL10%鹽酸的10 mL容量瓶中，用蒸餾水稀釋至刻度后搖勻。以蒸餾水為空白，在243nm處測(cè)定吸光度。分別取0.2 mL提取液、2 mL蒸餾水和0.8 mL1 mol/L氫氧化鈉溶液依次放入10 mL容量瓶中，混勻，15 min后加入10%鹽酸0.8 mL，混勻，加蒸餾水定容。以蒸餾水為空白對(duì)照，在243 nm處測(cè)定吸光度。 3.我根據(jù)文獻(xiàn)，看到有人在方法比較中還會(huì)運(yùn)用統(tǒng)計(jì)學(xué)，于是我根據(jù)資料用獨(dú)立樣本t檢驗(yàn)比較了兩個(gè)樣本的平均數(shù)的差異（兩種方法結(jié)果的差異），我覺(jué)得可以，老師說(shuō)讓我再查查資料什么的，所以想問(wèn)問(wèn)大家這樣可以么？ 本人菜鳥(niǎo)一個(gè)，好多地方不明白，連個(gè)簡(jiǎn)單的計(jì)算也弄不合適，希望大家?guī)蛶臀遥x謝大家了。 |
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【答案】應(yīng)助回帖
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| 文字好多，計(jì)算回收率，最理想的是用空白樣品（也就是樣品中沒(méi)有目標(biāo)物，比如你實(shí)驗(yàn)中的維生素C）加入一定量的目標(biāo)物，這個(gè)目標(biāo)物的量是已知的，然后按照你的方法步驟做一遍并測(cè)定，測(cè)定的結(jié)果除以已知量，結(jié)果就是回收率了。如：假設(shè)在一份不含維生素C的樣液中加入5mgVC，最后按照方法測(cè)出來(lái)是4mg，那么回收率就是80%。 |
3樓2015-04-19 23:36:53
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2樓2015-04-19 21:56:54
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4樓2015-04-20 20:21:10
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5樓2015-04-20 20:28:53
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