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醬油1991

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麻煩問(wèn)一下，農(nóng)桿菌電擊后出來(lái)的單菌落，搖菌的時(shí)候加多少的lb和抗生素，我的抗生素是利福平和卡那。之后做菌種檢測(cè)對(duì)嗎？

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1樓 2015-05-23 12:43:35

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醬油1991: 金幣+5, ★★★★★最佳答案 2015-05-24 09:26:36

陽(yáng)性檢測(cè)，不需要很多，1 mL足夠了。進(jìn)行后面的實(shí)驗(yàn)，鑒定陽(yáng)性后，再擴(kuò)大培養(yǎng)。至于抗生素濃度，你要看你們的母液是多大濃度，再查詢你們的使用濃度。農(nóng)桿菌培養(yǎng)基最好是用YEP。祝好

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2樓2015-05-23 14:33:38

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erland21411

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我最近才做完這個(gè)，正好來(lái)回答~嘿嘿~
我的也是利福平和卡納，如果你的農(nóng)桿菌也是GV3101，用LB完全沒(méi)問(wèn)題，利福平和卡那霉素的工作液濃度和50ug/ml，至于加多少要看你自己母液配成多少的了。
挑菌之后之后28℃，250rpm過(guò)夜，第二天做菌液PCR驗(yàn)證就好了。

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醬油1991

3樓2015-05-23 22:29:11

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醬油1991

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引用回帖:

3樓: Originally posted by erland21411 at 2015-05-23 22:29:11
我最近才做完這個(gè)，正好來(lái)回答~嘿嘿~
我的也是利福平和卡納，如果你的農(nóng)桿菌也是GV3101，用LB完全沒(méi)問(wèn)題，利福平和卡那霉素的工作液濃度和50ug/ml，至于加多少要看你自己母液配成多少的了。
挑菌之后之后28℃，25 ...

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4樓2015-05-23 23:32:00

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