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日光海銅蟲 (小有名氣)
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[求助]
Red敲除！求含sacB質(zhì)粒和卡那抗性質(zhì)粒 已有2人參與
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如題，最近小弟做Red敲除，用上海大學(xué)一教授贈與的pEX18Ap擴(kuò)sacB-bla打靶片段卻怎么也P不出來，已經(jīng)做了兩個月了還是木有結(jié)果 。結(jié)果用質(zhì)粒轉(zhuǎn)化DH5α后在15%蔗糖LB上都長出來了 。。。懷疑質(zhì)�？赡芩湾e了。所以想自己用overlap PCR將sacB和卡那霉素抗性片段連接到一起。但缺少sacB質(zhì)粒。求含sacB的pEX18Tc、pEX18Gm、pEX18Ap或pCVD442中的任何一種，若有卡那抗性的質(zhì)粒一并求助吧。目前實(shí)驗(yàn)室自己只有pRKaraRed和一些pMD18T等常規(guī)質(zhì)粒，如需要可交換互助。 |
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3樓2015-05-28 21:40:27
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4樓2015-05-29 12:39:53
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