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[交流] 根據(jù)mRNA設(shè)計(jì)的引物用gDNA做模板能否擴(kuò)增出目的片段？已有3人參與

如題，另外，如何在genebank上檢測(cè)我的引物是否包含內(nèi)含子呢？
謝謝大家?guī)臀襎-T

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1樓 2015-06-01 17:45:56

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打開(kāi)UCSC，在in silico PCR中輸入你的上下游引物，直接submit，看看產(chǎn)物大小就知道有沒(méi)有內(nèi)含子了，順便還能看看在基因組上的特異性怎么樣~

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2樓2015-06-01 23:55:05

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2樓: Originally posted by xmcliulei at 2015-06-01 23:55:05
打開(kāi)UCSC，在in silico PCR中輸入你的上下游引物，直接submit，看看產(chǎn)物大小就知道有沒(méi)有內(nèi)含子了，順便還能看看在基因組上的特異性怎么樣~

要選擇基因組genome。這種雞柔嫩艾美爾球蟲(chóng) 應(yīng)該選什么啊

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3樓2015-06-04 12:00:09

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是要構(gòu)建載體嗎？為什么不用cDNA做template呢？

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4樓2015-06-04 14:03:16

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4樓: Originally posted by piaoyidetian at 2015-06-04 14:03:16
是要構(gòu)建載體嗎？為什么不用cDNA做template呢？

因?yàn)槲业腞NA很容易降解啊~

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5樓2015-06-05 14:54:54

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引用回帖:

5樓: Originally posted by Cindycclove at 2015-06-05 14:54:54
因?yàn)槲业腞NA很容易降解啊~...

RNA都很容易降解的，在提取RNA過(guò)程中多注意細(xì)節(jié)還是能提到高質(zhì)量的RNA的，可以嘗試用OMEGA試劑盒提取，及時(shí)反轉(zhuǎn)錄

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6樓2015-06-06 16:58:21

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6樓: Originally posted by piaoyidetian at 2015-06-06 16:58:21
RNA都很容易降解的，在提取RNA過(guò)程中多注意細(xì)節(jié)還是能提到高質(zhì)量的RNA的，可以嘗試用OMEGA試劑盒提取，及時(shí)反轉(zhuǎn)錄...

是因?yàn)槲业臉悠肥潜４嬖趦?chǔ)存液里的蟲(chóng)卵，所以跟操作沒(méi)有關(guān)系。它一直在降解。。。

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7樓2015-06-07 12:40:47

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jinnini125

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8樓2017-05-09 15:01:29

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