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lo@丹丹@ve金蟲 (小有名氣)
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[求助]
關于葡萄糖檢測的問題 已有1人參與
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各位蟲友,你們在做葡萄糖檢測時,用的是我們平常用的D型葡萄糖嗎?還是經過什么處理,最近在做葡萄糖的檢測,但是增大葡萄糖的濃度,但是反應溶液還是不變色,求指點。 我是將葡萄糖溶解在磷酸緩沖溶液中,然后加入葡萄糖氧化酶,37℃,保溫1h,然后加入醋酸緩沖溶液、TMB、催化劑,繼續(xù)攪拌,但是溶液就是不變色,這是什么原因呢? |
葡萄糖氧化酶 |

金蟲 (著名寫手)
金蟲 (小有名氣)

金蟲 (著名寫手)
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不好意思,馬大哈沒看到你說了催化劑。我覺得不需要太在意避光是否,我做的時候能測出來就是普通的白色小離心管水浴鍋水浴能顯色。我覺得有幾點值得考慮,一,你用來產生羥基自由基的催化劑是否鐵基?是的話用磷酸緩沖液可能有影響,因為根據(jù)楊秀榮老師有關報道磷酸根會抑制四氧化三鐵的活性,你的催化是否有類似情況,可以考慮換醋酸緩沖液。二,是否葡萄糖氧化產生雙氧水的時候體積較大,導致在下一步氧化TMB顯色的時候加入的酸性緩沖液的pH超出最佳的催化條件,也就是說第一步溶液體積過大,后面再加酸溶液根本就沒達到pH 4.0左右的最佳催化條件。三,第二步的顯色催化仍讓需要37°左右水浴。 |
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