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小木蟲論壇-學術科研互動平臺 » 材料區(qū) » 微米和納米 » 合成表征 » UCNP修飾DNA一直不成功
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[求助]
UCNP修飾DNA一直不成功
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最近一直嘗試在PAA-UCNP上修飾NH2-DNA，可是一直沒有成功。主要參考了武大Wang等人的Aptamer biosensor based on fluorescence resonance energy transfer from upconverting phosphors to carbon nanoparticles for thrombin detection in human plasma[J]. Analytical chemistry, 2011, 83(21): 8130-8137.我的主要步驟如下： 1.5mg PAA-UCNP分散在2mLMES(10mM,PH5.5) 2.加入EDC ·HCl 0.8mg（2mM),NHS1.2mg(5mM),30℃緩慢振蕩30min； 3.離心（這一步水洗和未水洗都嘗試過） 4.分散在2mL 含2.5μM NH2-DNA的HEPES buffer（10mM，PH7.2）； 5.30℃，反應過夜； 6.離心，HEPES洗滌3次，最后分散在2mL Tris-HCl(10mM,PH7.4) 然后作紫外表征，在260nm附近看不到峰，上層液260nm仍有很強的DNA峰（和未修飾前一樣）。 有么有做過類似的，希望可以給點建議，謝謝！ |
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2樓2015-06-20 14:18:17
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