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roid617木蟲 (著名寫手)
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Agilent HPLC1260 每一針都比上一針出峰提前近一分鐘 已有15人參與
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如上： 檢測人參皂苷Rb1，中檢所對照品，濃度0.4mg/ml，現(xiàn)配 流動(dòng)相：乙腈：0.1%磷酸水（32:68），檢測波長203nm，柱溫30℃。停止時(shí)間30min。 如下圖所示，對照品連續(xù)進(jìn)樣，每針沒上一針提前近1min出峰，色譜柱是島津的C18柱，更換過同種類的，效果一樣。 液相應(yīng)該沒問題，之前同事測的其他成分出峰正常。難道是人參皂苷Rb1的原因？ ELR5ZTOH1S()]5307NP_ZW6.jpg |
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【答案】應(yīng)助回帖
感謝參與，應(yīng)助指數(shù) +1
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由液相比例閥控制的各個(gè)通道的流動(dòng)相比例可能不準(zhǔn)了。 液相比例閥的日常維護(hù)保養(yǎng) 1、不要在個(gè)通道內(nèi)存放水，每次使用結(jié)束時(shí)，清洗完色譜柱之后，必須將通道內(nèi)的水置換成甲醇；否則，一旦水中長菌，菌絲體會堵塞色譜柱，而且無法將其清洗出來。 2、不要在個(gè)通道內(nèi)存放乙腈，每次使用結(jié)束時(shí)，清洗完色譜柱之后，必須將通道內(nèi)的乙腈置換成甲醇；否則，乙腈在通道中長期存放，由于其對橡膠有溶脹作用，時(shí)間太久了就會導(dǎo)致比例閥的橡膠密封圈溶脹，從而導(dǎo)致比例閥輸出的流動(dòng)相比例不再準(zhǔn)確了。 3、HPLC儀器每隔3個(gè)月，建議用70度的高純熱水一次高速沖洗各個(gè)通道，沖洗結(jié)束后再將各個(gè)通道中置換成甲醇。 日常做好HPLC和色譜柱的養(yǎng)護(hù)，工作時(shí)儀器設(shè)備就不會出洋相。多年來，我用的儀器基本上不出問題，當(dāng)然，正常的更換能量不足的紫外燈、以及濾芯等不算在內(nèi)。 |
16樓2015-06-10 10:30:18
roid617
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9樓2015-06-09 11:16:12
13樓2015-06-09 14:08:47
【答案】應(yīng)助回帖
感謝參與，應(yīng)助指數(shù) +1
| 之前我碰到過類似問題，后來發(fā)現(xiàn)原因是比例閥出現(xiàn)問題，比如設(shè)定抽取B通道，但是在同時(shí)A通道的流動(dòng)相也在進(jìn)入系統(tǒng)，結(jié)果就是實(shí)際的流動(dòng)相比例在不斷改變，同樣的對照品出峰一針比一針晚。建議你試驗(yàn)一下是否也有相同的問題。假如你是把有機(jī)相和水相混合后單通道進(jìn)流動(dòng)相，這時(shí)你把另外三個(gè)通道過濾頭提起來，進(jìn)去一小段空氣，再放回去，看看在運(yùn)行時(shí)三個(gè)氣泡在管道中是否運(yùn)動(dòng)就知道了。 |
17樓2015-06-10 10:58:54
2樓2015-06-09 10:18:43
jinianwei
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3樓2015-06-09 10:41:20
roid617
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4樓2015-06-09 10:46:28
roid617
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5樓2015-06-09 10:47:09
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10樓2015-06-09 12:23:59
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