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愛(ài)琪琪吉子77銅蟲(chóng) (初入文壇)
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轉(zhuǎn)化后培養(yǎng)基上的單菌落怎么那么少，還有衛(wèi)星菌落 已有6人參與
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| 轉(zhuǎn)化后，在有氨芐青霉素的LB培養(yǎng)基上培養(yǎng)，一個(gè)板上只有幾個(gè)菌落，還有一部分是衛(wèi)星菌落，有的說(shuō)是放在培養(yǎng)箱里久了就長(zhǎng)成了衛(wèi)星菌落，可有的說(shuō)放再久也不會(huì)長(zhǎng)成衛(wèi)星菌落，如果是衛(wèi)星菌落說(shuō)是可能是污染的。一個(gè)板上不怎么也應(yīng)該有300個(gè)單菌落嗎？我的怎么只有幾個(gè)。PCR后發(fā)現(xiàn)是我要的1600pb，但我怕是污染的。是不是鏈接的問(wèn)題，時(shí)間短，效率低，只連接上了一小部分才出現(xiàn)這種情況啊。 |
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shiqili471
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5樓2015-06-10 19:10:47
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既然已經(jīng)成功得到陽(yáng)性轉(zhuǎn)化菌，為什么還要再做？ 氨芐青霉素的抗性基因編碼一個(gè)酶，被陽(yáng)性轉(zhuǎn)化菌分泌到胞外將菌所在地方的氨芐青霉素的酰胺環(huán)切開(kāi)，培養(yǎng)的時(shí)間越久，酶擴(kuò)散的范圍越大，平板上的氨芐青霉素被破壞得就越多。氨芐青霉素抑制了陰性轉(zhuǎn)化菌的生長(zhǎng)，久了之后自然就會(huì)有陰性菌在陽(yáng)性菌的周?chē)L(zhǎng)，形成衛(wèi)星菌落了。 沒(méi)必要擔(dān)心 |
9樓2015-06-11 03:31:41
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2樓2015-06-09 22:11:25
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3樓2015-06-09 23:58:49
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7樓2015-06-10 21:15:43
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8樓2015-06-11 00:24:16
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