 |
 |
 |
 |
 |
 |
||
 |
 |
 |
 |
 |
小木蟲論壇-學(xué)術(shù)科研互動平臺 » 生物醫(yī)藥區(qū) » 分子生物 » DNA重組 » 酶連
| 9 | 1/1 | 返回列表 |
| 查看: 1476 | 回復(fù): 8 | ||
[求助]
酶連 已有3人參與
|
|
請教各位 我最近在用TAKARA的T4 DNA連接酶做載體（6.5kb）和目的片段（0.5kb）的連接，但是翻看了一下說明書，沒有推薦反應(yīng)體系，不知道怎樣的配比才能提高連接效率，請各位指點(diǎn)迷津，另外大家都在用什么反應(yīng)條件，我看有37℃，16℃和4℃，哪個方法高效快捷呢？謝謝 |
回復(fù)此樓» 猜你喜歡
蛋白質(zhì)檢測：精準(zhǔn)分析，解鎖生物分子的密碼
已經(jīng)有0人回復(fù)
-
不合理蛙科研實驗之小鼠實驗：嚴(yán)謹(jǐn)設(shè)計，解析生命機(jī)制的重要載體
已經(jīng)有0人回復(fù)
-
化學(xué)工程及工業(yè)化學(xué)論文潤色/翻譯怎么收費(fèi)?
已經(jīng)有247人回復(fù)
-
不合理蛙科研實驗之重金屬檢測：精準(zhǔn)篩查，守護(hù)健康與環(huán)境的防線
已經(jīng)有0人回復(fù)
-
不合理蛙科研實驗之“蛙測重金屬我背鍋三千”
已經(jīng)有0人回復(fù)
-
不合理蛙科研實驗之“鼠逃三次我發(fā)三篇SCI”
已經(jīng)有0人回復(fù)
-
納米粒度分析
已經(jīng)有3人回復(fù)
-
林科院林化所招收材料與化工專業(yè)碩士，坐標(biāo)南京
已經(jīng)有0人回復(fù)
-
留學(xué)--博士招生
已經(jīng)有15人回復(fù)
-
化學(xué)工程，本211，求調(diào)劑，ab區(qū)不限
已經(jīng)有4人回復(fù)
董博士
金蟲 (正式寫手)
- 應(yīng)助: 155 (高中生)
- 金幣: 3129.9
- 紅花: 24
- 帖子: 312
- 在線: 96.2小時
- 蟲號: 3524307
- 注冊: 2014-11-07
- 專業(yè): 醫(yī)學(xué)圖像數(shù)據(jù)處理與分析
2樓2015-06-14 13:23:01
ultimica
銅蟲 (初入文壇)
- 應(yīng)助: 2 (幼兒園)
- 金幣: 101.5
- 帖子: 11
- 在線: 21.3小時
- 蟲號: 3241454
- 注冊: 2014-05-29
- 性別: GG
- 專業(yè): 基礎(chǔ)獸醫(yī)學(xué)
【答案】應(yīng)助回帖
★ ★ ★ ★ ★
xh446063: 金幣+5, ★★★很有幫助 2015-06-19 19:16:48
xh446063: 金幣+5, ★★★很有幫助 2015-06-19 19:16:48
|
我個人常用的連接體系如下： 目的片段酶切產(chǎn)物 6微升 質(zhì)粒載體酶切產(chǎn)物 2微升 ddH2O 4微升 T4 連接酶10X Buffer 1.5微升 T4 連接酶 1.5微升 其中可根據(jù)測的目的片段和質(zhì)粒載體酶切產(chǎn)物的濃度調(diào)整摩爾體積，總比例為載體：目的片段=1:3~1:9，和樓上推薦的基本沒差，其余用水補(bǔ)全，共計15微升體系，16℃水浴連接過夜，望采納。 |
3樓2015-06-16 10:26:20
露露琦琦
新蟲 (初入文壇)
- 應(yīng)助: 0 (幼兒園)
- 金幣: 11.5
- 帖子: 3
- 在線: 25分鐘
- 蟲號: 3926697
- 注冊: 2015-06-16
- 專業(yè): 免疫生物學(xué)
4樓2015-06-16 10:28:57
5樓2015-06-19 19:17:41
6樓2015-06-19 19:18:47
7樓2015-06-19 19:20:09
geyihui
新蟲 (小有名氣)
- 應(yīng)助: 6 (幼兒園)
- 金幣: 448.4
- 散金: 52
- 帖子: 51
- 在線: 44.8小時
- 蟲號: 2617801
- 注冊: 2013-08-26
- 專業(yè): 生物化學(xué)
8樓2015-07-21 10:09:46
雪糕哦
新蟲 (著名寫手)
- 應(yīng)助: 0 (幼兒園)
- 金幣: 3203.4
- 散金: 898
- 紅花: 5
- 帖子: 1440
- 在線: 223.1小時
- 蟲號: 4297825
- 注冊: 2015-12-19
- 專業(yè): 獸醫(yī)傳染病學(xué)
9樓2017-03-17 15:54:29
相關(guān)版塊跳轉(zhuǎn)
我要訂閱樓主 xh446063 的主題更新
| 9 | 1/1 | 返回列表 |
| 最具人氣熱帖推薦 [查看全部] | 作者 | 回/看 | 最后發(fā)表 | |
|---|---|---|---|---|
|
[考研] 085600 材料與化工 329分求調(diào)劑 +9 | Mr. Z 2026-03-25 | 9/450 |
|
|---|---|---|---|---|
|
|
[考研] 化學(xué)調(diào)劑一志愿上海交通大學(xué)336分-本科上海211 +4 | 小魚愛有機(jī) 2026-03-25 | 4/200 |
|
|
[考研] 303求調(diào)劑 +6 | 藍(lán)山月 2026-03-25 | 6/300 |
|
|
|
[考研] 一志愿南航 335分 | 0856材料化工 | GPA 4.07 | 有科研經(jīng)歷 +6 | cccchenso 2026-03-23 | 6/300 |
|
|
|
[考研] 329求調(diào)劑 +3 | 鈕恩雪 2026-03-25 | 3/150 |
|
|
|
[考研] 0854人工智能方向招收調(diào)劑 +4 | 章小魚567 2026-03-24 | 4/200 |
|
|
|
[考研] 考研化學(xué)308分求調(diào)劑 +10 | 你好明天你好 2026-03-23 | 11/550 |
|
|
|
[考研] 318求調(diào)劑 +5 | plum李子 2026-03-21 | 8/400 |
|
|
|
[考研] 材料學(xué)求調(diào)劑 +6 | Stella_Yao 2026-03-20 | 6/300 |
|
|
|
[考研] 一志愿武理085500機(jī)械專業(yè)總分300求調(diào)劑 +3 | an10101 2026-03-24 | 7/350 |
|
|
|
[考研] 306求0703調(diào)劑一志愿華中師范 +10 | 紙魚ly 2026-03-21 | 11/550 |
|
|
|
[考研] 307求調(diào)劑 +5 | 超級伊昂大王 2026-03-24 | 5/250 |
|
|
|
[考研] 一志愿河北工業(yè)大學(xué)0817化工278分求調(diào)劑 +7 | jhybd 2026-03-23 | 12/600 |
|
|
|
[考研] 335求調(diào)劑 +4 | yuyu宇 2026-03-23 | 5/250 |
|
|
|
[考研] 一志愿國科過程所081700，274求調(diào)劑 +3 | 三水研0水立方 2026-03-23 | 3/150 |
|
|
|
[考研] 一志愿武理材料工程348求調(diào)劑 +6 | ￣^￣゜汗 2026-03-19 | 9/450 |
|
|
|
[考研] 276求調(diào)劑 +3 | YNRYG 2026-03-21 | 4/200 |
|
|
|
[考研] 308求調(diào)劑 +3 | 墨墨漠 2026-03-21 | 3/150 |
|
|
|
[考研] 材料學(xué)碩301分求調(diào)劑 +7 | Liyouyumairs 2026-03-21 | 7/350 |
|
|
|
[考研] 336求調(diào)劑 +5 | rmc8866 2026-03-21 | 5/250 |
|