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小肉團(tuán)子金蟲(chóng) (小有名氣)
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[求助]
MTT測(cè)細(xì)胞增殖應(yīng)該選用幾個(gè)時(shí)間點(diǎn)?CCK-8呢?表征改性后鈦表面的生物相容性。 已有7人參與
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我是做鈦表面改性的,現(xiàn)在想表征其生物相容性,準(zhǔn)備做細(xì)胞增殖實(shí)驗(yàn),但是不知道該選用哪一種,F(xiàn)有兩種:MTT和CCK-8,但是很多疑問(wèn): 1、關(guān)于方法選擇:CCK-8方法比較便捷、靈敏,但是為什么現(xiàn)有的做生物材料的文獻(xiàn)中很少有用CCK-8的,是因?yàn)镃CK-8不同時(shí)間長(zhǎng)度的不能比較嗎? 2、關(guān)于時(shí)間點(diǎn)選擇:文獻(xiàn)中做MTT的,有用1個(gè),2個(gè)還有3-5個(gè)時(shí)間點(diǎn)的,這個(gè)應(yīng)該怎么選擇呢? 如果用CCK-8又需要做幾個(gè)時(shí)間點(diǎn)呢? 3、無(wú)論哪種方法,一般需要重復(fù)幾次數(shù)據(jù)才算有效呢? 本人學(xué)材料的,對(duì)生物方面了解甚少,最近因?yàn)檫@些問(wèn)題很苦惱 ,又比較著急知道,查了很多查不到答案,還請(qǐng)各位前輩蟲(chóng)友們賜教!真得很感謝!![]() ![]() ![]() |
金蟲(chóng) (小有名氣)
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問(wèn)題1,CCK-8的原理跟MTT相似,不同之處在于CCK-8法生成的formazan是水溶性的,不需要再吸出培養(yǎng)液加入有機(jī)溶劑溶解這個(gè)步驟,因此可以減少一定的誤差。其他優(yōu)點(diǎn)就是重復(fù)性優(yōu)于MTT;對(duì)細(xì)胞毒性小。但是CCK-8比MTT的價(jià)格要貴不少,所以一般來(lái)說(shuō),還是MTT法用的多。 問(wèn)題2,沒(méi)有明白你說(shuō)的時(shí)間點(diǎn)是什么,是測(cè)量周期么?這個(gè)應(yīng)該和你選擇的細(xì)胞有關(guān) 問(wèn)題3,材料一般要做3個(gè)重復(fù)樣,每個(gè)重復(fù)樣還要做3個(gè)MTT或者CCK-8 希望可以幫到你 |

銅蟲(chóng) (初入文壇)
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第一點(diǎn),如樓上所說(shuō)MTT比較經(jīng)典,便宜,不過(guò)CCK-8也不是很貴(相對(duì)于動(dòng)輒兩三千塊的抗體來(lái)說(shuō)),CCK-8價(jià)格是幾百塊吧,CCK-8操作簡(jiǎn)單,不需要溶解這一步,而且染色后更換培養(yǎng)基,細(xì)胞可以繼續(xù)養(yǎng)。 第二點(diǎn),無(wú)論是MTT還是CCK-8,做細(xì)胞的增殖實(shí)驗(yàn)(或是生長(zhǎng)曲線),肯定是需要檢測(cè)多個(gè)時(shí)間點(diǎn)的,比如1天,3天,5天,7天。一個(gè)時(shí)間點(diǎn)的,那可能是細(xì)胞毒性實(shí)驗(yàn),比如說(shuō)不同濃度藥物對(duì)細(xì)胞毒性的影響,加入不同濃度的藥物,培養(yǎng)24h(根據(jù)藥物情況,一般24h或者48h)。 第三點(diǎn),每個(gè)孔至少有三個(gè)副孔。 |
銀蟲(chóng) (小有名氣)
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1、我們以前用的MTT,后來(lái)用的CCK-8比較多。相對(duì)來(lái)說(shuō),CCK-8更加靈敏,更加便捷,但是價(jià)格稍微貴點(diǎn) 2、時(shí)間點(diǎn)是根據(jù)你的實(shí)驗(yàn)安排的,最好看看相關(guān)的參考文獻(xiàn)。一般有1天、4天、7天,或者7天、14天。 3、平行樣本的話當(dāng)然越多越好,但是為了實(shí)驗(yàn)簡(jiǎn)便和科學(xué)需要,一般至少做3個(gè),我們一般做5-6個(gè),減少誤差。 |

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