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yb494546440金蟲(chóng) (初入文壇)
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[求助]
黑曲霉電轉(zhuǎn)的問(wèn)題 已有1人參與
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| 求助各位大神， 我最近在做黑曲霉的轉(zhuǎn)化，質(zhì)粒有1萬(wàn)左右的bp，先做了幾次原生質(zhì)體PEG介導(dǎo)轉(zhuǎn)化，沒(méi)長(zhǎng)出來(lái)，然后就參照了王正祥的《黑曲霉電轉(zhuǎn)化條件的研究》和一篇英文文獻(xiàn)《Transformation of Intact Aspergillus niger by Electroporation》，單菌落長(zhǎng)的很正常，做了菌落PCR對(duì)抗性基因進(jìn)行驗(yàn)證也沒(méi)問(wèn)題，但是再傳一代再做菌落PCR就P不出來(lái)了，難道是菌種的問(wèn)題，造成質(zhì)粒丟失？菌株是誘變過(guò)的，實(shí)驗(yàn)室也從來(lái)沒(méi)做過(guò)絲狀真菌的分子操作，只能一點(diǎn)點(diǎn)摸索，不知道還有哪些要注意的地方，十分感謝！ |
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2樓2015-10-21 16:50:12
jean_liang
金蟲(chóng) (小有名氣)
爐中小鳥(niǎo)
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另，祝你順利 3樓2015-10-26 12:16:18
4樓2016-11-14 10:57:01
道格森
新蟲(chóng) (初入文壇)
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- 專業(yè): 質(zhì)譜分析
5樓2018-04-18 11:24:08
王徐萍
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6樓2018-09-02 21:24:20
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