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yb494546440金蟲 (初入文壇)
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[求助]
黑曲霉電轉(zhuǎn)的問題 已有1人參與
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| 求助各位大神, 我最近在做黑曲霉的轉(zhuǎn)化,質(zhì)粒有1萬左右的bp,先做了幾次原生質(zhì)體PEG介導(dǎo)轉(zhuǎn)化,沒長出來,然后就參照了王正祥的《黑曲霉電轉(zhuǎn)化條件的研究》和一篇英文文獻(xiàn)《Transformation of Intact Aspergillus niger by Electroporation》,單菌落長的很正常,做了菌落PCR對抗性基因進(jìn)行驗證也沒問題,但是再傳一代再做菌落PCR就P不出來了,難道是菌種的問題,造成質(zhì)粒丟失?菌株是誘變過的,實驗室也從來沒做過絲狀真菌的分子操作,只能一點點摸索,不知道還有哪些要注意的地方,十分感謝! |
金蟲 (小有名氣)
爐中小鳥



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