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欣然回憶銀蟲(chóng) (小有名氣)
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[求助]
質(zhì)粒轉(zhuǎn)染細(xì)胞,在G418抗生素存在時(shí)細(xì)胞可活,但Western測(cè)不到目的蛋白???? 已有1人參與
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| G418篩選濃度為300ug/mL,用的是QIAGEN的Effectene轉(zhuǎn)染試劑,轉(zhuǎn)染后的30天,細(xì)胞大量存活,于是用Western檢測(cè),但是檢測(cè)不到目的蛋白,是不是我沒(méi)有進(jìn)行挑選單克隆這一個(gè)步驟,導(dǎo)致拷貝數(shù)不同的細(xì)胞都混合起來(lái)了,于是得不到轉(zhuǎn)染目的基因成功的細(xì)胞呢?可是為什么我的細(xì)胞又能在G418里存活?求解??萬(wàn)分感謝!! |
金蟲(chóng) (正式寫(xiě)手)

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