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Laure629新蟲 (初入文壇)
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[求助]
第一次用PI法測(cè)細(xì)胞凋亡，求大家指點(diǎn)...！ 已有2人參與
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偶按文獻(xiàn)上的濃度，用咪喹莫特給角質(zhì)形成細(xì)胞系給藥，誘導(dǎo)它凋亡，再用PI法測(cè)流式。 由于咪喹莫特是乳膏，給藥時(shí)用DMSO+DMEM溶解的...可是顯微鏡下看發(fā)現(xiàn)含有藥的培養(yǎng)基里有許多黑色小顆粒，培養(yǎng)基像懸濁液一樣，是不是藥物木有溶解完全，會(huì)影響實(shí)驗(yàn)嘛...? 24小時(shí)后，觀察到給藥組大量細(xì)胞凋亡溶解，收集細(xì)胞做PI染色時(shí)，每到用PBS離心清洗細(xì)胞的步驟時(shí)，細(xì)胞都會(huì)少好多啊，最后細(xì)胞直接沒有了  ��！是不是我收集細(xì)胞太晚了，細(xì)胞太脆弱，一碰就碎的原因....? |
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徐州往事
鐵桿木蟲 (正式寫手)
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2樓2015-07-17 15:17:12
★ ★
Laure629: 金幣+2, ★★★很有幫助, 感謝感謝！ 2015-08-03 14:37:40
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3樓2015-07-19 11:02:19
dumbooo
新蟲 (初入文壇)
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| 染細(xì)胞用的板子要是V型的，最好是那種不容易粘細(xì)胞的，而且要調(diào)整離心機(jī)轉(zhuǎn)數(shù)，棄上清的時(shí)候不能抖，要一次甩干凈；另外也有可能是你的imiquimod濃度比較高，導(dǎo)致細(xì)胞凋亡，或者細(xì)胞污染或狀態(tài)不佳，染色時(shí)細(xì)胞的確會(huì)變少，但不至于沒有；PI染色需要用濾網(wǎng)過(guò)濾，避免堵塞機(jī)器，不知道你有沒有做，你要從頭到尾回憶幾遍有可能是哪里出了問(wèn)題，或者是多方面的問(wèn)題，最后提醒你PI有毒，記得戴口罩，我也經(jīng)驗(yàn)不足，僅作參考 |
4樓2015-07-19 21:35:58
永遠(yuǎn)的笑蓮
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5樓2015-07-27 11:54:53
永遠(yuǎn)的笑蓮
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6樓2015-07-27 11:57:06
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