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firthzhang鐵蟲 (初入文壇)
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[求助]
電泳的marker出問題 已有1人參與
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最近50X的TAE電泳液用完了，自己按照takara的書上配制了1L，但是跑膠的marker一直如下圖所示，救命啊，看過帖子，查過文獻(xiàn)，從電泳儀到藥品都換了，還是不行，而且以前也配過，沒有問題，就是最近的出問題了，之前在跑膠時(shí)電壓90，電流34ma；現(xiàn)在是電壓90時(shí)電流就變成了100ma。之后把電泳液稀釋到0.5X使用電流下來了，但是marker還是老樣子，急救啊，后期都快癱瘓了�。。�！跪謝大神 不同實(shí)驗(yàn)室的膠粉.jpg 超純水配制電泳液，2000marker.jpg 在別人用別家tae自家膠粉跑電泳（7.21）.jpg 換了電泳液新配.jpg 搞不明白了.jpg |
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firthzhang
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6樓2015-07-24 11:03:26
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【答案】應(yīng)助回帖
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firthzhang(西門吹雪170代發(fā)): 金幣+2, 鼓勵(lì)回帖交流 2015-07-24 10:22:49
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之前在跑膠時(shí)電壓90，電流34ma；現(xiàn)在是電壓90時(shí)電流就變成了100ma。之后把電泳液稀釋到0.5X······ 你得知道問題出在哪，我們實(shí)驗(yàn)室跑膠恒壓100v，大概30min就好了，TAE、瓊脂糖膠自己配的，marker出來不會(huì)像你那樣拖好長(zhǎng)。還有你跑膠別亂換參數(shù)，電泳液1xTAE，檢查這些如果都沒問題，那是marker不好用了，何不更換marker再試試？ |
2樓2015-07-23 19:36:18
firthzhang
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3樓2015-07-23 20:03:52
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firthzhang(西門吹雪170代發(fā)): 金幣+3, 鼓勵(lì)回帖交流 2015-07-24 10:23:01
firthzhang(西門吹雪170代發(fā)): 金幣+3, 鼓勵(lì)回帖交流 2015-07-24 10:23:01
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你的maker條帶雖然出問題，但是是很有規(guī)律的。你的maker的前兩條帶都基本正常，但是一旦到了第三條以后就隨著片段的長(zhǎng)度增大而變化增大。也就是說小片段不出問題，而大片段出問題小片段和大片段在膠了的區(qū)別是找到問題的門。大片段受到的電場(chǎng)了大，但是隨之電場(chǎng)力的增加，阻力增加的程度也就更快，而所有的拖帶都是阻力和電場(chǎng)力的相互作用程度超過了一定范圍造成的。而阻力的增加程度趨勢(shì)，和你的帶型受影響程度趨勢(shì)是一致的。電流的改變，電壓的影響造成了阻力和電場(chǎng)力的不均衡浮動(dòng)。大片段分開的慢，在未分開之前帶同一種電荷相互作用力時(shí)間愈長(zhǎng)效果愈差。你打破了新的平衡，電流的變動(dòng)也就打破力的平衡，片段愈大受影響愈大。個(gè)人認(rèn)為調(diào)動(dòng)電壓降電流的效果會(huì)比調(diào)動(dòng)電泳液降電流的效果好！在一個(gè)你想用的電泳液濃度下調(diào)動(dòng)電壓，膠濃度來平衡。個(gè)人意見僅供參考。 |
4樓2015-07-23 21:02:54
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