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ktom000新蟲 (初入文壇)
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[交流]
大腸桿菌與酵母體系中,怎么進行表達外源蛋白的膜定位? 已有3人參與
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我需要做的事情就是將外源蛋白表達在細胞外膜上,不知道如何定位?我現(xiàn)在研三,剛開題,除看文獻外沒有任何基礎(chǔ),時間緊迫... 以下思路: 1.LamB蛋白153位點插入外源蛋白,但是我不知道難度如何,操作工具是否難獲得,能不能成功; 2.信號肽-外源蛋白-lgA等膜上蛋白系統(tǒng),如OmcP、a凝集素等,這套系統(tǒng)信號肽,膜錨定蛋白選擇什么容易成功,具體序列,我也不知道; 3.是否存在質(zhì)粒有這種特殊功能的,我只知道有分泌蛋白表達系統(tǒng),如果有好獲得么,時間緊迫; 4.其他一些思路或建議,比如外源蛋白的特殊要求,整個實驗中需要注意的地方等等,求指導(dǎo)... 另外詢問一下,自己設(shè)計的基因序列,在大腸桿菌、酵母中表達的情況,能否表達(不要求活性的情況下),會不會被水解掉 還是有什么高招,可以指導(dǎo)我怎么將自己設(shè)計的基因序列在細菌、真菌的細胞外膜上表達。 不勝感激,聯(lián)系方式:290602987@qq.com,重點是思路雖然清楚,但可行性不了解,并且實驗工具獲得難度不清楚,操作難度不清楚... 時間緊迫!別問我前兩年干什么了,上過研的都應(yīng)該知道,我只能說我不是玩過來的,其他話不好說... |
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