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[交流]
大腸桿菌與酵母體系中，怎么進行表達外源蛋白的膜定位？ 已有3人參與
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我需要做的事情就是將外源蛋白表達在細胞外膜上，不知道如何定位？我現(xiàn)在研三，剛開題，除看文獻外沒有任何基礎，時間緊迫... 以下思路： 1.LamB蛋白153位點插入外源蛋白，但是我不知道難度如何，操作工具是否難獲得，能不能成功； 2.信號肽-外源蛋白-lgA等膜上蛋白系統(tǒng)，如OmcP、a凝集素等，這套系統(tǒng)信號肽，膜錨定蛋白選擇什么容易成功，具體序列，我也不知道； 3.是否存在質粒有這種特殊功能的，我只知道有分泌蛋白表達系統(tǒng)，如果有好獲得么，時間緊迫； 4.其他一些思路或建議，比如外源蛋白的特殊要求，整個實驗中需要注意的地方等等，求指導... 另外詢問一下，自己設計的基因序列，在大腸桿菌、酵母中表達的情況，能否表達（不要求活性的情況下），會不會被水解掉 還是有什么高招，可以指導我怎么將自己設計的基因序列在細菌、真菌的細胞外膜上表達。 不勝感激，聯(lián)系方式：290602987@qq.com，重點是思路雖然清楚，但可行性不了解，并且實驗工具獲得難度不清楚，操作難度不清楚... 時間緊迫！別問我前兩年干什么了，上過研的都應該知道，我只能說我不是玩過來的，其他話不好說... |
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