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ktom000新蟲 (初入文壇)
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[交流]
大腸桿菌與酵母體系中，怎么進(jìn)行表達(dá)外源蛋白的膜定位？ 已有3人參與
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我需要做的事情就是將外源蛋白表達(dá)在細(xì)胞外膜上，不知道如何定位？我現(xiàn)在研三，剛開題，除看文獻(xiàn)外沒有任何基礎(chǔ)，時(shí)間緊迫... 以下思路： 1.LamB蛋白153位點(diǎn)插入外源蛋白，但是我不知道難度如何，操作工具是否難獲得，能不能成功； 2.信號(hào)肽-外源蛋白-lgA等膜上蛋白系統(tǒng)，如OmcP、a凝集素等，這套系統(tǒng)信號(hào)肽，膜錨定蛋白選擇什么容易成功，具體序列，我也不知道； 3.是否存在質(zhì)粒有這種特殊功能的，我只知道有分泌蛋白表達(dá)系統(tǒng)，如果有好獲得么，時(shí)間緊迫； 4.其他一些思路或建議，比如外源蛋白的特殊要求，整個(gè)實(shí)驗(yàn)中需要注意的地方等等，求指導(dǎo)... 另外詢問一下，自己設(shè)計(jì)的基因序列，在大腸桿菌、酵母中表達(dá)的情況，能否表達(dá)（不要求活性的情況下），會(huì)不會(huì)被水解掉 還是有什么高招，可以指導(dǎo)我怎么將自己設(shè)計(jì)的基因序列在細(xì)菌、真菌的細(xì)胞外膜上表達(dá)。 不勝感激，聯(lián)系方式：290602987@qq.com，重點(diǎn)是思路雖然清楚，但可行性不了解，并且實(shí)驗(yàn)工具獲得難度不清楚，操作難度不清楚... 時(shí)間緊迫！別問我前兩年干什么了，上過研的都應(yīng)該知道，我只能說我不是玩過來的，其他話不好說... |
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